碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)伯乐代理授权一级代理

2023-06-28

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

产品简介:

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需zui适pH9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在pH9.2~9.8的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸不萘酚,后者与偶联重氮盐生成有产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠。

产品组成:

编号

名称

D2804

4×2ml

D2804

4×10ml

D2804

4×20ml

Storage

试剂(A):ALP固定液

2ml

10ml

20ml

RT避光

试剂(B):

ALP孵育液

B1:AS-BI染色液

1ml

5ml

10ml

-20℃避光

B2:FBB染色液

1ml

5ml

10ml

-20℃避光

临用前,按 B1:B2=1:1 比例混合,即为 ALP 孵育液,即配即用。

试剂(C):核固红染色液

2ml

10ml

20ml

4℃避光

试剂(D):甲基绿染色液

2ml

10ml

20ml

RT避光

使用说明书

1份

自备材料:

1、载玻片、湿盒

2、显微镜

操作步骤(仅供参考):

(一)、涂片或切片

1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无需固定),水洗。

2、滴加配制好的ALP孵育液,放入湿盒中,避光孵育15~20min,水洗。

3、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min。

4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。

(二)贴壁培养细胞

1、取6孔板或其他容器培养的细胞,弃液,PBS清洗干净。

2、加入ALP固定液固定3min或4%多聚甲醛固定10~15min,PBS清洗。

3、滴加配制好的ALP孵育液,放入湿盒中,避光孵育15~20min,PBS清洗。

4、入核固红染色液或甲基绿染色液复染3~5min。

5、PBS 清洗、镜检。

染色结果:

ALP活性部位

蓝色

细胞核

红色(核固红)或绿色(甲基绿)

血液、骨髓涂片结果判断:

一般以积分报告结果,根据 100 个中性粒细胞阳性颗粒进行 0~4+计分。

细胞分值

染色特点

0

无颗粒

1

稍有颗粒

2

中等程度颗粒

3

多数颗粒

4

充满颗粒

临床意义:

1、类白血病反应积分明显增高,未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。

2、急性细菌感染积分明显增高,病毒感染积分多正常或减低。

3、再生障碍性贫血积分常增高,PNH、MDS积分常减低。

注意事项:

1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。

2、培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。

3、ALP孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。

4、复染时,核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。

5、每次染色时,应有阳性对照片。

有效期:6个月有效。

© bio-rad伯乐一级代理 |伯乐Aminex |伯乐电泳槽1658001| 伯乐ddPCR bio-rad授权代理商、biorad伯乐qpcr仪是专业的授权总代理区域代理经销平台。
© 如需询价,请加客服QQ:1749072012 、客服微信:jinshanbio,或发送邮件到1749072012@qq.com
© 平台为生命科学研究相关领域提供一站式耗材试剂仪器解决方案和采购服务,数据资源基于CC协议。
© 本文地址:https://gibcohyclone.cn/thread-6565.htm
产品询价需求提交
返回