超敏 ECL 显色试剂盒-试剂盒

2024-07-24

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通用型 ECL 显色试剂盒

本产品是一种灵敏度高的化学发光试剂盒,基本原理是以 luminol 为基础的化学发光;可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)发生反应而发光,通过 X-光胶片曝光或其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测;低浓度样本依然能够检测信号,节省样本;低浓度抗体(一抗、二抗)孵育之后依然能够检测到信号,节省珍贵的抗体;相较于通用型ECL 化学发光试剂盒,信号值至少增强 10 倍,检测灵敏度达到飞克级。

产品组分

A 液

B 液

运输与保存方法

常温运输。频繁使用可置于室温保存,一年稳定;长期不用,建议置于 4 ºC 保存延长效期。

操作方法

使用 CCD 拍照:可以将膜放置于工作液中,开机后按照使用说明,将膜取出,进行拍照。另外,也可以根据情况,调整机器测量参数,提高信噪比。

曝光方法

使用 CCD 拍照:可以将膜放置于工作液中,开机后按照使用说明,将膜取出,进行拍照。另外,也可以根据情况,调整机器测量参数,提高信噪比。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)转膜、封闭、孵育都需要避免气泡,另外戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的干净。

3)长时间曝光或蛋白过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。

4)某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜

5)避免将多张膜置于同一个洗膜盒内洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。

6)使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。

7)使用生物素-亲和素系统,避免使用牛奶封闭,可能会导致背景过高。

8)金属氧化物颗粒可能会造成膜上出现颗粒状斑点,避免使用带有锈迹的剪刀以及镊子,建议使用塑料的平头镊子。

9)叠氮*钠(NaN3)能抑制 HRP 活性,若回收 HRP 标记探针或者抗体应避免使用 NaN3,如必需使用勿超过 0.01%。

10)本品无特殊毒性,按普通化学品处理。11) 本产品仅作科研用途!

问题与解决方案

遇到的问题原因分析推荐解决方法
胶片无条带显现或者信号较弱转膜的效率低提高转膜效率,用预染 Marker 判断。
抗原/抗体量少或不匹配增加抗原/抗体量或选择合适抗原/抗体
X 光胶片有问题曝光后 X 光谱全黑(而非透明色),则表明胶片已全曝光,使用新的 X 光片
显影/定影液有问题可预先曝光一张胶片进行判断,如有问题当换用新的显影/定影液
反应系统中 HRP 量过多稀释 HRP 标记物
X 光片背景脏一抗二抗浓度太高降低抗体浓度,延长封闭时间
抗体未清洗干净增加洗膜次数
条带有空斑抗原以及二抗的浓度过高稀释样品重新跑胶,也可将混合好的显色液冰浴后,加到膜上即刻快速显色。
带型不规则转膜有气泡或甲醇(对于PVDF 膜)水化不均匀优化转膜条件。

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通用型 ECL 显色试剂盒

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