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土壤全磷含量测定
微量法100管/96样
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
土壤全磷包括有机磷和无机磷,有机质中的有机磷可受土壤微生物的分解,转化为无机磷,可供植物吸收利用,土壤中磷素营养状况影响作物的产量和质量,而土壤的全磷主要来自土母质和施用的肥料,反映了土壤潜在的供磷能力。
测定原理
混合酸高温消解土壤样品,采用钼锑抗比色法测定样品中的磷含量。
自备实验用品及仪器
消解仪、消化管、天平、烘箱、100目筛、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液管、浓硫酸、高氯酸。
试剂组成和配制
试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1支,4℃避光保存。临用前加0.2mL蒸馏水溶解。
试剂三:液体0.4mL×1支,4℃保存。
工作液:临用前将试剂二和试剂三充分混匀,加19.4mL蒸馏水混匀。
样本处理
新鲜土样风干或50℃烘干,过100目筛,称0.5g左右置于消化管中,加1mL蒸馏水润湿样品,再加10mL浓硫酸,摇匀后加入高氯酸0.2mL,轻轻摇匀,同时做两个样品空白管,置于消解仪上,消解参数设置为:100℃,10min;200℃,10min;350℃,20min;400℃,30min。消解结束后用蒸馏水定容至100mL,静置后分别取1mL样品空白及样品消解液,分别加入0.5mL试剂一混匀作为待测样品。
测定操作表
| 空白管 | 测定管 |
样本(μL) | | 20 |
空白消解液(μL) | 20 | |
工作液(μL) | 180 | 180 |
充分混匀,25℃静置30min |
于微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定700nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 |
注意:空白管只需测定一次。
计算公式
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 2.1476x -0.0011,R2= 0.9983;(x为标准磷浓度,μmol/mL;y为吸光值A)
全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷2.1476×V总÷W×10-3×31
= 1.443×(△A+0.0011)÷W
V总:加入提取液体积,100mL,W:样本质量,g
用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 1.0738x -0.0011,R2= 0.9983;(x为标准磷浓度,μmol/mL;y为吸光值A)
全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷1.0738×V总÷W×10-3×31
= 2.887×(△A+0.0011)÷W
V总:加入提取液体积,100mL,W:样本质量,g
注意事项
配好的试剂3天内使用完。
*低检出限为10mg/Kg。
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