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mirus Trans IT-VirusGEN® 转染试剂

TransIT-VirusGEN® 转染试剂旨在增强包装和转移质粒向贴壁和悬浮 HEK 293 细胞类型的递送，以增加重组腺相关病毒 (AAV) 和慢病毒的产量。

TransIT-VirusGEN® 转染试剂的主要优点包括：

• 性能– 高效 DNA 递送，用于生产高滴度病毒载体

• 可扩展性– 从 < 1 ml 到大规模培养的高效生产

• 灵活性——兼容不同的重组病毒和细胞培养系统

• 无动物源性– 全合成转染试剂配方

TransIT-VirusGEN® 是学术研究和生物制药发现的理想选择。使用 VirusGEN® AAV 转染试剂盒和 VirusGEN® LV 转染试剂盒中包含的优化增强剂可以进一步提高滴度。

TransIT-VirusGEN® 在悬浮和贴壁 AAV 细胞培养中优于竞争对手试剂。在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞或贴壁 293T/17 细胞 (B) 用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper（比例为 1:1:1，1.5 µg）转染/ml，Agilent Technologies），使用以下试剂：TransIT-VirusGEN®（2:1，体积：重量）、竞争产品 B4 (3:1)、竞争产品 B5 (3:3:1) 或 25 kDa PEI (4: 1、综合科学）。使用收获的病毒转导 HT1080 细胞，并在转导后 48 小时使用番石榴 easyCyte™ 5HT 流式细胞仪测量 GFP 表达。功能效价是通过 GFP 阳性细胞少于 20% 的病毒稀释液来测量的。误差线代表一式三份孔的标准偏差。

TransIT-VirusGEN® 在悬浮和贴壁慢病毒细胞培养中优于竞争对手试剂。在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞或贴壁 293T/17 细胞 (B) 用 pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ 转移载体和由 MISSION® 提供支持的慢病毒包装混合物转染（ 1:1 比例，1 µg/ml），使用以下试剂：TransIT-VirusGEN®（3:1，体积：重量）、竞争产品 B4（2:1 (A) 或 3:1 (B)）、竞争产品 B5 （2:2:1 (A) 或 3:3:1 (B)）或 25 kDa PEI（4:1，Polysciences）。收获上清液，过滤（0.45 µm），并使用 293T/17 细胞进行滴定。慢病毒转导在 8 µg/ml Transduce存在下进行转导后 72 小时使用番石榴 easyCyte™ 5HT 流式细胞仪测量 IT™ 和 GFP 表达。功能效价是通过 GFP 阳性细胞少于 20% 的病毒稀释液来测量的。误差线代表一式三份孔的标准偏差。

TransIT-VirusGEN® 实现广泛的可扩展性 (AAV)。使用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper（比例为 1:1:1，总计 1.5）转染在 FreeStyle™ F17 培养基 (A) 中生长的悬浮 FreeStyle™ 293-F 细胞或贴壁 293T/17 细胞 (B) µg/ml，Agilent Technologies），使用TransIT-VirusGEN® 转染试剂（试剂与 DNA 比例为 2:1（体积：重量），Mirus）在一定体积的培养皿中。收获的病毒用于转导 HT1080 细胞，并在转导后 48 小时通过流式细胞术测量 GFP 表达。功能效价是通过 GFP 阳性细胞少于 20% 的病毒稀释液来测量的。误差线代表一式三份的孔、烧瓶或培养皿的标准偏差。

与 PEI 相比， TransIT-VirusGEN®具有更高的慢病毒生成转染效率。使用TransIT-VirusGEN® 转染试剂（试剂与 DNA 比例为 3:1；体积：重量），用慢病毒包装质粒和 (a) 对照 RFP 转移质粒或 (b) 靶向 SPdCas9-RFP 转移质粒转染 HEK293T/17 细胞) 或 25 kDa 线性 PEI（试剂与 DNA 比例为 3:1；重量：重量）。转染后 17-22 小时拍摄明场和 RFP 图像。

mirus Trans IT-VirusGEN® 转染试剂