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BPS Science 检测试剂盒KRAS 异构体 B 偶联核苷酸交换检测试剂盒

●描述

KRAS IsoformB Coupled Nucleotide Exchange Assay Kit 设计用于通过监测效应蛋白（例如 Raf1 的 Ras 结合域 (RBD-cRaf)）与 KRAS 的结合来筛选和分析 KRAS IsoformB 拮抗剂/抑制剂。使用该试剂盒，只需在微量滴定板上进行几个简单的步骤即可进行核苷酸交换检测。首先，将含有 GDP 负载的 KRAS 异构体 B 的样本与 SOS1 和 GTP 一起孵育以进行核苷酸交换。接下来，添加 RBD-cRAF 并孵育以进行

效应器-RAS 结合。然后，添加受体和供体珠并孵育以进行检测，然后读取 Alpha 计数。

SOS1(son of sevenless) 是一种鸟嘌呤核苷酸交换因子，可促进 GDP 与 GTP 的交换。加载 GDP 的 KRAS 异构体 B 处于非活动状态，不与 cRAF 的 Ras 结合域 (RBD) 相互作用。SOS1 协助从 KRAS 同种型 B 释放 GDP，以便 GTP 可以占据核苷酸结合口袋。这导致 KRAS 异构体 B 的构象变化，允许其与 RBD-cRAF 结合。KRAS IsoformB Coupled Nucleotide Exchange Assay Kit 利用 GST 标记的 RBD-cRAF 和 His 标记的 KRAS Isoform B 在 Alpha 测定中测定 KRAS 与 RBD-cRAF 的结合。谷胱甘肽受体和 Ni 螯合物供体珠通过 KRAS 和 RBD-cRAF 的结合进入近端范围，使能量在激光激发后从供体转移到受体珠。

背景

高水平的野生型 KRAS 会导致细胞复制和生长减慢，并增加细胞凋亡。这可以由细胞压力、某些类型的辐射、化学信号和其他提示引起。野生型 KRAS 还可以通过与突变 KRAS 蛋白二聚化来防止突变 KRAS 过度激活。

研究 KRAS 野生型和突变形式的行为差异尤为重要，因为 KRAS 突变导致了 30% 以上的人类癌症。影响核苷酸交换（GDP 到 GTP）反应的化合物提供了一种抑制 KRAS 驱动肿瘤中肿瘤细胞生长的新方法。2021 年，美国食品药品监督管理局批准使用 AMG510（Sotorasib），这是一种针对非鳞状非小细胞肺癌的强效 KRAS G12C 抑制剂。

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