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Collagenase,产品型号:9001-12-1 。
Collagenase,描述:
粗制胶原酶制剂包含两种不同胶原酶的几种亚型,一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨肽酶。这种胶原蛋白水解和蛋白水解活性的结合可有效分解细胞间基质,这是组织分离的重要部分。该复合物的一个成分是一种水解酶,它优先降解 Pro-Y-Gly-Pro 序列中 Y-Gly 键的天然胶原蛋白中的螺旋区域,其中 Y 最常见的是中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步肽酶消化的产物。粗胶原酶会被金属螯合剂(如半胱氨酸、EDTA 或邻菲咯啉)抑制,但不会被 DFP 抑制。它也被 α2-巨球蛋白(一种大的血浆糖蛋白)抑制。Ca2+ 是酶活性所必需的。
•1 型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。•2 型含有较高相对水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。•类型 3含有水平的二级蛋白酶。•4 型被设计为具有特别低的胰蛋白酶活性以限制对膜蛋白和受体的损害。• 5 型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。• 6 型含有高胶原酶活性,酪蛋白酶与胶原酶的比例约为 2:1。相对于 I 型 ( col ) 富集II型 (colH) 胶原酶G)。• 7 型胶原酶和酪蛋白酶活性比 1 型和 2 型胶原酶高四倍。
•纯化的胶原酶,代码:CLSPA,含有极少的次级蛋白水解活性和高胶原酶活性。
新的!无动物类型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2胶原酶源自在不含动物成分的培养基中生长的培养物,专为必须防止引入潜在动物来源病原体的生物加工应用而设计。二级蛋白酶的水平类似于 1 型和 2 型胶原酶。 •CLSAFA是最初的 AFA 等级,旨在含有类似于 1 型和 2 型胶原酶的胶原酶和二级蛋白酶。•CLSAFA含有比CLSAFA 更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。•CLSAFC具有特别低的胰蛋白酶活性,类似于 4 型胶原酶。•STZ1 & STZ2,0.22μ过滤的STEMxyme® AOF 胶原酶/中性蛋白酶 (Dispase®) 混合物,用于原代细胞和干细胞分离。 |
Worthington 还提供各种预包装形式的 0.22µm 过滤制剂,用于直接重建和用于细胞分离和培养程序。酶类型与不同组织的有效性之间的相关性很好,部分原因在于使用参数的可变性。然而,大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。可在Worthington 酶手册中找到 Worthington 胶原酶和污染物检测的详细说明。此外,可在Worthington 组织解离指南中找到组织特定参考资料和详细的分离条件。
胶原酶测定是 Mandl 的改进,其中将胶原酶与天然胶原一起孵育 5 小时,并使用 Moore 和 Stein, JBC, 176, 367, (1948) 比色茚三酮法测定胶原分解的程度。释放的氨基酸表示为每毫克胶原酶的微摩尔亮氨酸。
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