18080-044invitrogen反转录酶III SuperScript

2024-07-28

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invitrogen反转录酶III SuperScript​,逆转录酶3应用:*链cDNA 合成、阵列标记、cDNA 文库、RT-PCR、引物延伸和3′ 和5′ RACE。规格:10000U来源:纯化自表达M-MLV 的pol 基因的大肠杆菌(1,2),通过突变增加了热稳定性和半衰期,降低了RNase H 活性。库存状态:现货

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invitrogen反转录酶III SuperScript​,逆转录酶3

SuperScriptIII 反转录酶(RT) (SuperScript III Reverse Transcriptase (RT)) 是SuperScriptII RT 的专有突变体,在50°C 具有活性,半衰期为220 分钟,使用基因特异性引物(GSP) 提高特异性,在所有RT 中cDNA 产量zui高。如果要进行特定基因的RT-PCR 或从总RNA 或poly (A)+ RNA 样品生成cDNA,该产品十分理想。和SuperScriptII 一样,它可以从单链RNA、DNA 或RNA:DNA 杂合体合成互补DNA 链。通过引入点突变对SuperScript III RT 进行遗传改造,这些点突变可以增加半衰期、降低RNase 活性并增加热稳定性。进行结构修饰后:

  • 50°C 时半衰期为220 分钟,获得zui高的cDNA 产量(图1)
  • RNase H 活性降低,获得更多全长cDNA
  • 在50°C 有zui大活性,用GSP 增加特异性
  • 能增加RT 单位而不抑制后续的PCR

invitrogen反转录酶III SuperScript​,逆转录酶3

性能和质量测试:SDS-PAGE 纯度;脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析(图2)及cDNA 产物的产量和长度。单位定义:一个单位的SuperScript? III RT 是在37°C 的反应体系中,使用poly(A)?oligo(dT)12-18作为模板?引物,在10 分钟内将1 纳摩尔脱氧核糖核苷酸掺入酸沉淀材料所需的酶量(3)。单位反应条件:50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。0.5 更看更多mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)12-18、0.1 mg/ml BSA 和酶,共50 μl,温度37°C,时间10 分钟。

​,逆转录酶3

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