K289520 测序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒,含 One Shot™ MAX Efficiency™ DH5α-T1R 大肠杆菌,测序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒,含 One Shot™ M

2024-10-23

测序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒,含 One Shot™ MAX Efficiency™ DH5α-T1R 大肠杆菌

货号:K289520

规格:25 reactions

价格:8988

产品类型:分子克隆

品牌:Thermo Fisher

测序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒可提供高效、5 分钟的一步克隆策略 (“TOPO™ Cloning”),用于将校正性聚合酶–扩增平末端 PCR 产物直接插入质粒载体中以进行测序。每个试剂盒均使用含经过特殊设计的测序引物位点(可从各反应中获得更多的插入序列和更少的载体序列)的 pCR™4Blunt-TOPO™ 载体。这些试剂盒具有克隆和选择包含您首选 PCR 片段的重组载体所需的所有物品。获得更多序列—使用标准测序引物时可获得更多的插入序列和更少的载体序列•快速且简便—从 PCR 至克隆仅需 3 步,手动操作时间短至 5 分钟•高效—可获得高达 95% 含正确插入片段的克隆•久经考验—在过去十余年中性能可靠,引用次数超过 4000 次测序用 Zero Blunt™ TOPO™ 克隆试剂盒 试剂盒概述•载体:pCR™4Blunt-TOPO™ 载体—克隆载体经过优化,可改善测序结果•克隆方法:使用 TOPO™ Cloning— 拓扑异构酶 I 在 5 分钟内将校正性聚合酶扩增 PCR 产物(带有平末端)连接至载体•感受态细胞:多种选项—从包含一般、高效、噬菌体 T1 抗性或快速生长型感受态细胞的试剂盒中选择pCR™4Blunt-TOPO™ 载体—针对测序进行优化我们从 pCR™4Blunt-TOPO™ 载体中删除了大量的多克隆位点,以将测序引物位点与插入位点之间的距离缩短至 33 bp。这意味着测序反应具有更少的载体序列和更多的插入序列。pCR™4Blunt TOPO™ 载体具有 4 种常见测序引物的位点:M13 正向、M13 反向、T7 和 T3。该试剂盒包括各等份试液。pCR™4Blunt-TOPO™ 克隆选择和操作pCR™4Blunt-TOPO™ 载体包含氨苄青霉素和卡那霉素抗性标记物以及用于阳性选择的LacZα-ccdB基因融合。载体的尽可能减少的化多克隆位点仍包括用于克隆 PCR 产物简化切除的旁侧 EcoRI 位点和用于在测序前生成嵌套缺失的唯一 Sse8387I 位点。’T7 和 T3 启动子也用于体外转录。简化的基于 TOPO™ 的克隆使用 TOPO 克隆技术,无需使用含有特异性序列的 PCR 引物、PCR 后程序、载体制备或其他耗时长的 DNA 操作步骤。™只需将 PCR 反应物直接添加至提供的拓扑异构酶带电载体中,孵育 5 分钟,并使用提供的大肠杆菌感受态细胞进行转化。高效克隆携带所需插入片段的克隆高达 95%,您可以筛选更少的克隆体,以帮助您节省时间和成本。该试剂盒中使用的 pCR™4Blunt-TOPO™ 载体无突出端,用于高效连接由校正性耐热聚合酶(可留下平末端 PCR 产物)产生的 PCR 产物。克隆标准在克隆方面,TOPO™ 克隆技术已作为一种可靠技术供成千上万的科学家使用达十余年。快速、简单易用且高效的 TOPO™ 克隆已在多种应用中应用于多种不同载体。测序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒 试剂盒选项根据您的需要,测序用 Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒可与可提供不同优势的多种感受态细胞一起购买:• 一般克隆:TOP10(货号 K2875-J10、K2875-20、K2875-40)• 高效克隆:TOP10 Electrocomp™ 细胞(货号号 K2880-20、K2880-40)• 一般克隆,噬菌体 T1 抗性:DH5α-T1R(货K2895-20)• 快速生长:Mach1™-T1R 化学感受态大肠杆菌(货号 K2835-20)TOPO™ 产品仅供研究使用。不得用于人或动物的治疗或诊断。
组份
盒 1:• 拓扑异构酶 I 活化 pCR™4Blunt-TOPO™ 载体• 盐溶液• dNTP• 对照模板• T3、T7、M13 正向和 M13 反向引物• 对照 PCR 引物• 无菌水在 -5 至 -30°C 下储存。妥善储存时,所有试剂均可稳定储存 6 个月。盒 2:• One Shot™ 化学感受态或 Electrocomp™大肠杆菌• S.O.C. 培养基• 超螺旋 pUC19 对照质粒在 -68 至 -85°C 下储存。

技术参数
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