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HisPur™ Cobalt Superflow Agarose,HisPur™ Cobalt Superflow Agarose/HisPur™钴超流琼脂糖

2024-10-23

HisPur™ Cobalt Superflow Agarose/HisPur™钴超流琼脂糖

货号：25228,25229,25230,25231

规格：10 mL,50 mL,250 mL,1 L

价格：1382,6254,27298,82203

产品类型：蛋白提取/纯化

品牌：Thermo Fisher

Thermo Scientific HisPur 钴 Superflow 琼脂糖是一种带二价钴电荷的四配位基螯合 Superflow 6 支持相，可专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行高纯度大规模纯化。HisPur 钴 Superflow 琼脂糖的特点：•稳健— 高度交联的 6% 琼脂糖 Superflow 微珠状支持相可耐受高达 1200 cm/小时的线性流速，且由于钴离子上结合了四配位基螯合剂而极少发生浸出•高得率— 在 150 cm/小时线性流速下，每 mL 树脂可结合 20 mg 6xHis-GFP；在某些流速下，结合能力可超过 30 mg/mL 树脂•高纯度— 钴与组氨酸标签的特异性结合可大大提高洗脱组分的纯度，使得非特异性蛋白的污染率低于 10%•兼容— 可在各种化学物质和 pH 值环境中保持活性•高性价比— 本树脂经多次清洗和重复利用后仍保持稳定HisPur 钴 Superflow 琼脂糖是一种高度交联的耐用树脂，在中等规模至大规模 FPLC 纯化作业所用流速下不会发生压缩。此树脂在各种化学剂和 pH 值环境下均保持稳定，适用于常见的原位清洁流程。与固定化金属亲和色谱 (IMAC) 所使用的镍及其他配体相比，钴对 His 标签蛋白纯化具有更高的特异性。HisPur 钴 Superflow 琼脂糖与蛋白的特异性结合可提高洗脱组分的纯度，从而省去了额外的纯化步骤。应用：•多聚组氨酸标签蛋白的大规模 FPLC 纯化亲和色谱是一种常用的快速简便的重组蛋白纯化方法。在这类纯化方法中，有一种是将多聚组氨酸标签结合到二价金属阳离子上，此金属阳离子则是由固定在磁珠支持相上的螯合剂进行协调。当对 His 标签蛋白进行固定化金属亲和色谱 (IMAC) 纯化时，微珠、螯合剂以及固定金属的类型将会影响这些纯化操作的纯度、得率以及流速性能。与交联度较低的琼脂糖树脂相比，高度交联的 6% 琼脂糖 Superflow 微珠状支持物可耐受更高的线性流速。本 HisPur 钴 Superflow 琼脂糖实验方案采用温和的洗涤和洗脱条件，通常可获得纯度大于 90% 的目标蛋白。采用 HisPur 钴 Superflow 琼脂糖获得的蛋白纯度通常高于镍 IMAC 树脂，这使得 HisPur 钴 Superflow 琼脂糖成为一步纯化的极佳之选。此外，对于那些要求树脂在中等压力水平下不出现压缩的大规模纯化作业，HisPur 钴 Superflow 琼脂糖是理想之选。

数据：

Medium scale FPLC purification of 6xHis-GFP produces >90% purity of target protein100g of biomass containing overexpressed 6xHis-GFP was lysed with 1L of lysis buffer supplemented with Halt Protease Inhibitor (Part No. 78439) and loaded onto an equilibrated 200mL column (50mm x ~100mm) of Thermo Scientific HisPur Cobalt Superflow Agarose or Clontech™ TALON™ Superflow (Takara Bio Co.) at a flow rate of 20mL/minute, then washed until baseline with wash buffer containing 15mM imidazole. Bound protein was eluted with buffer containing 150mM imidazole. Fractions containing purified 6xHis-GFP were pooled and quantitated using Pierce 660nm Protein Assay (Part No. 22662). Load, flow-through, wash, and eluate fractions (5μg) were separated by SDS-PAGE, stained with coomassie dye and evaluated using myImageAnalysis Software (Part No. 62237) to determine purity. Total yield, recovery, and purity were nearly identical for both resins.

Properties of Thermo Scientific HisPur Cobalt Superflow Agarose

技术参数

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