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SuperQuick RT MasterMix(For Real-time PCR)
本产品是专为 Real-time RT-PCR 而研发的快速逆转录试剂混合液。5× SuperQuick RT MasterMix中包含SuperQuickRT逆转酶、 Rnase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer 等从 RNA模板逆转录成 cDNA 第 一链所需的全部试剂。该产品的逆转录效率高,可对少量 RNA 模板进行良好 的逆转录反应,15 分钟即可完成荧光定量模板 cDNA***链合成。另外,逆转 录反应温度可以提高到 50℃,可通读 GC含量高和二级结构复杂的 RNA模板。 本试剂盒操作十分方便快捷,仅需加入 RNA 模板和水即可进行逆转录反应, 特别适合于高通量检测。
产品特点1.简便:即用型逆转录 Mix,只需加入 RNA 模板和水,便可进行反应。2.快速:15 分钟完成 cDNA 第一链合成。3.反转录效率高:反转录效率高于 90%。4.灵敏度高:pg 级模板也可以得到高质量的 cDNA。5.通读复杂模板:GC 含量高和二级结构复杂模板。注意事项1.在操作过程中应避免 Rnase 污染,防止 RNA 降解或实验中的交叉污染,建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,使用专门的仪器和耗材。2.逆转录体系配制在冰上进行操作,防止 RNA 发生降解。试剂盒的 MasterMix使用后尽快置于-20℃保存,并尽量避免反复冻融。3.反应体系可倍比放大,10ul 反应体系可最大使用 1ug 总 RNA。4.对于二级结构复杂的 RNA 模板,建议在操作步骤之前,将模板 RNA 在 65℃孵育 5min 立刻置于冰上,短暂离心后进行下一步操作。使用方法1.将模板 RNA 在冰上解冻;将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上,使用前将每种溶液涡旋振荡混匀,并经短暂离心后使用。2.根据以下表格配制反应体系(反应液配制请在冰上进行),涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:1) 如果总RNA量大于1ug,请按比例扩大反应体系。2)5×SuperQuick RT MasterMix中含有Oligo(dT)、Random primer、RnaseInhibitor、dNTPs、RT Buffer等。3.42 ℃孵育15分钟。注意:对于二级结构复杂或GC含量高的模板,可以提高逆转录温度至50℃,增强逆转录效率。4.85℃孵育5分钟,使逆转录酶失活。5.短暂离心后置于冰上,再进行后续Real-time PCR检测,如果需要长时间保存,请置于-20℃。注意:进行Real-time PCR反应时,逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途
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