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水土中总磷酸盐测试盒
微量法100T/96S
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式,反应了水土中的磷酸盐水平,是一个水质和土壤质量评价的重要指标。
测定原理
在酸性溶液中,在分解剂和高温条件下,将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐,正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸,在还原剂存在时被还原为磷钼蓝,在710nm处有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品
天平,震荡仪、常温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体40mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体4mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加4mL蒸馏水充分溶解,然后将试剂五全部加入试 剂四中充分混匀。
试剂五:液体×1支,4℃保存。
样品处理
水样:按照水样体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)为10:1:2的比例(建议取1mL水样,加入100μL试剂一和200μL试剂二)95℃沸水浴30min,冷却后待测。
2. 土样:按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL):试剂一体积(V):试剂二体积(V)=1:10:1:2(建议称取约0.1g土样,加入1mL蒸馏水,再加入100μL试剂一和200μL试剂二),95℃沸水浴振荡30min,10000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
测定操作表
| 空白管 | 测定管 |
样本(μL) | | 40 |
试剂三(μL) | 40 | 40 |
试剂四(μL) | 40 | 40 |
蒸馏水(μL) | 120 | 80 |
充分混匀,25℃静置10min,于96孔板测定710处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 |
计算公式
标准曲线:y = 0.0237x + 0.0016,R2= 0.9989;x为PO4-浓度μg/mL,y为吸光值△A。
1. 水样:
总磷酸盐含量(μg/mL)= (△A-0.0016)÷0.0237×V样÷(V样÷V样总)
= 54.8×(△A-0.0016)
2. 土样:
总磷酸盐含量(μg/g)= (△A+0.0063)÷0.0489×V样÷(W×V样÷V样总)
=54.8×(△A+0.0063)÷W
V样:加入样本体积;0.04mL;V样总:样本总体积,1.3mL;W,土样质量,g。
注意事项
1. 配制的试剂四一周内使用完。
2. 检出限为65μg/mL或65μg/g。
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