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ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体
| 主要描述： | C4d 补体 [LP69] |
| 目标抗原： | C4d 补体 |
| 目录号： | 智商431 |
| 数量： | 0.1毫克 |
| 专注： | 1毫克/毫升 |
| 克隆： | LP69 |
| 主持人： | 老鼠 |
| 同种型： | 免疫球蛋白G1 |
| 免疫原： | 从正常人血浆中补充 C4d |
| 物种反应性： | 人类 |
| 纯化： | 蛋白G亲和层析 |
| 格式： | 含有 PBS + 10mM 纯化抗体 |
| 应用： | IHC-P、IHC-Fr |
| 稀释： | 最佳抗体稀释度应通过滴定确定，但 IHC-P 的指导原则是使用 1:25-1:50 |
| 也称为： | DADB-112B14.11、C4B1、C4B12、C4B2、C4B3、C4B5、C4F、CH、CO4、CPAMD3、FLJ60561、MGC164979 |
| 已发布 ID： | 34231390、27146825、23443736 |
| Entrez 基因 ID： | 100293534、100507685、720、721 |
| SwissProt ID： | p0c0l4, p0c0l5 |
| Omim ID(s):： | 120810, 120820 |
协议免疫荧光实验方案 - 甲醛固定
从 Tcunit 收集细胞，并使用吸力从培养皿中取出培养基。
用 1x PBS 清洗并去除。
将细胞在预温 (37°C) 多聚甲醛中在定轨摇床上室温孵育 12 分钟。
除去PFA并在1x PBS中的0.5% Triton X-100中在室温下孵育5分钟。
准备封闭试剂，这也是抗体稀释液。
在室温下用 1x PBS 洗涤细胞 2x，在轨道摇床上洗涤 4 分钟/洗涤。
用 1% NCS 和 1x PBS 在室温下封闭 30 分钟。
准备一抗（50μl/盖玻片）和湿染色室。
在室温下用 lx PBS 清洗细胞 2x，并短暂风干。
在染色室中、黑暗中、室温下与一抗一起孵育 1 小时。在此期间准备二抗。
用 1x PBS 清洗细胞 5 次（更换烧杯 5 次/每个烧杯计数 5 次）
在染色室中、黑暗中、室温下与二抗一起孵育 1 小时。
用 1x PBS 清洗细胞 5x。
坐于大皮。
溶液（染色当天新鲜配制）。
1.75g PFA 溶于 20 ml d.H2O 加 5 滴 1M NaOH 中。在 50-60°C 的热板上搅拌直至溶解。添加 4 滴 HCl 并检查 pH 指示条。 PH值应为7.4。用 d.H2O 补足体积至 25ml，并添加 25ml 2xPBS。添加到盖玻片之前检查 pH 值。
免疫荧光实验方案 - 甲醇/丙酮固定
从 TCunit 收集细胞，并使用吸力从培养皿中取出培养基。
用 1x PBS 清洗并去除。
用冷甲醇:丙酮 1:1 在冰上固定细胞 10 分钟。
准备封闭剂，这也是抗体的稀释剂。
除去固定剂并在室温下用1x PBS洗涤细胞3x，在定轨摇床上洗涤4分钟/洗涤。
在 RT 下用 1% NCS 和 1x PBS 封闭 30 分钟。
准备一抗（50μl/盖玻片）和湿染色室。
在 RT 下用 1 x PBS 清洗细胞 2x，并风干约 7 分钟。
在染色室中在黑暗中与一抗一起在室温下孵育 1 小时。在此期间准备二抗。
用 1x PBS 清洗细胞 5 次（更换烧杯 5 次/每个烧杯计数 5 次）
在染色室中在黑暗中与二抗一起在室温下孵育 1 小时。
用 1x PBS 清洗细胞 5x。
坐于大皮。
溶液（染色当天新鲜配制）
蛋白质印迹实验方案
将凝胶转移到 PDVF 或硝酸纤维素膜上
将膜放入塑料托盘中，并在封闭缓冲液中搅拌一小时
在洗涤缓冲液中冲洗
在洗涤缓冲液加一抗中孵育一小时
用洗涤缓冲液洗涤 6 X 5 分钟
在加二抗的洗涤缓冲液中孵育一小时
用洗涤缓冲液洗涤 6X 5 分钟
检测（例如 ECL、Amersham 根据制造商说明）
洗涤缓冲液
PBS + 0.1% 吐温 20
封闭缓冲液
洗涤缓冲液+5%奶粉
所用抗体的浓度取决于每种抗体、抗原的量和所用的检测方法。一般来说，稀释度在几百倍到几千倍稀释范围内，但通常必须凭经验确定。
ImmuQuest公司提供一系列*和新颖的抗体，以尽可能高的质量制造，处于科学研究的前沿。 我们所做的每一件事都是根据研究人员的需要来开发的。只要有可能，我们的抗体就会在WB、ELISA、IHC(冰冻切片和石蜡切片)和ICC/IF等应用程序中进行测试，并在我们的数据表中公布。许多都可以以定制的格式提供。Immuquest的大多数抗体都是在我们自己的严格控制下制造的。这意味着你将永远知道你点的东西是高质量的。
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ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体
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