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bioenno 复染套件

复染试剂盒专门设计用于对已完成酶组织化学、免疫组织化学、原位杂交或高尔基体染色的脑切片进行复染。它还适用于常规组织学切片，包括冷冻和石蜡包埋的组织切片以及培养细胞。该套件提供 3 种复染溶液（红色、绿色和紫蓝色），可直接从滴管瓶中使用。这些染料溶液的配方使研究人员能够以较低的背景对细胞元素进行可靠、最特异的染色。

(A) 用甲酚紫溶液复染切片。免疫反应产物（棕色）首先使用 Bioenno DAB 试剂盒开发。 (B) DAB-Co 试剂盒用于培养免疫反应性神经元（蓝黑色），然后进行中性红复染。 (C) 甲基绿复染。棕色浦肯野细胞使用 DAB 试剂盒进行培养。 (D) DAB 和 BDHC 试剂盒均用于呈现双标记（分别为棕色和蓝色），然后进行甲酚紫复染。 (E,F) Bioenno superGolgi 试剂盒用于对树突棘进行染色（切片厚度为 150 µm），然后进行甲酚紫 (E) 和中性红 (F) 复染。所有图像均取自成年小鼠的大脑。

试剂盒提供的试剂：

• 甲酚紫：30 毫升溶液装在滴管瓶中。该溶液配制用于对神经元细胞质中的尼氏体进行染色。尼氏物质（粗面内质网）将被染成紫蓝色。

• 甲基绿：30 ml 溶液装在滴管瓶中。甲基绿是一种核复染剂，可将细胞核染成浅绿色。该溶液已用氯仿纯化。

• 中性红：30 毫升溶液装在滴管瓶中。该溶液可用作各种组织学程序中的红色核复染剂。

• 醋酸乙醇：30 ml 分化溶液装在滴管瓶中。大多数情况下不需要区分染色。然而，在此溶液中孵育切片可能有助于消除非特异性背景染色。该溶液含有70%乙醇和0.02%乙酸。

使用说明：

(A) 完成免疫组织化学 (IHC/ICC)、原位杂交 (ISH) 或高尔基体染色的切片：



1. 完成 IHC/ICC、ISH 或高尔基体染色，并将组织切片安装在粘性显微镜载玻片上。在室温（RT，18-25°C）下风干载玻片。

2. 在 0.01 M PBS-T 中清洗干燥载玻片 1-5 分钟，然后在 dH2O 中冲洗 1-3 秒。

3. 将载玻片放在水平表面上，然后将一种复染溶液涂抹到切片上。确保这些部分全被溶液覆盖。根据所需的强度和组织类型，在 RT 下孵育切片 1-5 分钟。孵育后，用 dH2O 洗掉多余的复染溶液。

• 在显微镜下检查染色切片以获得最佳结果。

• 最佳时间应由研究者确定。某些特定组织可能需要更长的孵育时间。

4. 如果需要，区分试剂盒中提供酸性乙醇或 70% 乙醇几秒到几分钟的切片，并在显微镜下检查以获得最佳结果。用 dH2O 洗掉乙醇。

• 细胞成分和背景的染色强度在酸性乙醇或70%乙醇中快速降低。

• 如果染色较浅，只需重新涂抹复染溶液并再次孵育切片即可。

5. 将载玻片风干，然后直接在 100% 乙醇中脱水切片 1-2 次，每次 3-5 分钟。在二甲苯或二甲苯替代品中透明，更换2-3次，每次3-5分钟。使用 Permount® 封固剂盖玻片。

• 对于较厚的高尔基体染色切片，可能需要更长的脱水和透明时间。

(B) 常规组织学切片：

1. 切片应安装在明胶包被的或带正电的载玻片上。石蜡包埋切片在染色前应脱蜡。

2. 风干切片/载玻片。在 0.01 M PBS-T 中清洗载玻片 1-5 分钟，然后在 dH2O 中冲洗 1-3 秒。

3. 如上所述，在一种复染溶液中染色 1-5 分钟。

4. 如果需要，可在酸性乙醇或 70% 乙醇中分化几秒至几分钟，并在显微镜下检查以获得最佳结果。

5. 在 100% 乙醇中脱水，在二甲苯或二甲苯替代品中澄清，并用如上所述的非水封固剂盖玻片。

储存、安全和操作注意事项：

• 将套件存放在 2-25°C 下，并避免强直射光。

• 该试剂盒仅供体外研究使用，不适用于药物、诊断或其他用途。

• 该试剂盒含有与皮肤接触、吸入或摄入可能有害的试剂。请勿用嘴移液。使用普通预防措施避免吸入以及接触皮肤和眼睛。如果接触，请立即用大量水清洗并就医。如果吞咽，请用水漱口并立即就医。

• 在化学罩下进行实验。处理试剂盒试剂时，请穿戴合适的防护服、手套和眼睛/面部防护装置。进行实验后洗手。

• 可根据要求提供材料安全数据表 (MSDS)。

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