PDEase-100-PDEase Kit-化学试剂

2024-07-24

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PDEase Kit,产品型号:PDEase-100。

PDEase Kit,

cAMP 是第二信使,普遍存在于所有哺乳动物细胞中。该信使调节多种激素、神经递质、生长因子、细胞因子和其他配体受体的信号转导。cAMP 磷酸二酯酶为水解和截断响应受体激活而产生的 cAMP 信号提供了途径。cAMP 水解活性由一个相当大的多酶家族提供,该家族具有细胞内定位和调节特性。在各种 PDE 家族(PDE1-PDE11)中,PDE4 有 4 个基因(PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D)以多剪接变异形式表达。

PDE4 活性测量需要两步反应,在第一个反应中,cAMP 被 PDE 活性水解成非环状形式。通过使 PDE 源变性或通过添加 PDE4 选择性抑制剂来终止该反应,然后通过第二个酶促反应将 AMP 转化为腺苷达到平衡。由于腺苷是中性的,cAMP 或 AMP 通过离子交换色谱法按电荷分离。为了避免其他 PDE 的背景贡献,该 PDE 测定在针对 PDE4 优化的底物浓度下进行。PDE4 酶活性与第一个反应中形成的腺苷成正比。

这种 PDE4 活性测量可在 2-3 小时内提供可重现的结果。该试剂盒提供足够的试剂以串联处理 50 或 100 个样品以及内部对照。在推荐条件下储存时,试剂盒试剂可稳定 6 个月。该套件的内容物必须按照瓶子标签和规格表上的指示在不同的温度下储存。

概述

产品

PDEase 试剂盒

描述

旨在让研究人员确定 PDE4 活性

内容

孵育缓冲液 A

5毫升

孵育缓冲液 B

5毫升

孵育缓冲液 C

5毫升

PDE 底物缓冲液 D

10毫升

PDE底物

2X 200 微升

抑制剂缓冲液

50 毫升

第二酶源 (10X)

2X 250 微升

树脂浆料 (10X)

100米升

对照 PDE4 酶

1x200 微升

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