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qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*不同于抗体介导的方法,HotStarTaq DNA Polymerase应用化学介导的热启动,可确保聚合酶在PCR初始加热阶段*没有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供*的QIAGEN PCR Buffer,将非特异性扩增产物、引物二聚体和其他污染降至Z低。一种新型的添加剂Q-Solution,
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qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*
出色的表现。
将50拷贝的HIV-pol基因重组体加入1 µg人基因组DNA中,扩增497 bp的片段。采用不同的热启动酶:QIAGEN的HotStarTaq DNA Polymerase(HotStarTaq);Supplier AII的热启动酶(Hot-start enzyme);Supplier L的Taq抗体混合物(Antibody-mediated);Supplier R的非热启动酶(No hot start)。特异性的PCR产物如箭头所示。取等体积的反应产物在2%的琼脂糖凝胶上分析。M:分子量标准。
qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*
对不同引物-模板体系均有较高的特异性。
在相同的条件下,使用Supplier R的Taq DNA聚合酶 (R) 或HotStarTaq DNA Polymerase (H),对三种不同的引物-模板系统进行扩增。System 1:从人基因组DNA中扩增1.1 kb的D-IgI同系物片段。System 2:从人基因组DNA中扩增与X染色体链锁型青年型视网膜裂损症相关的296 bp的染色体区域片段。System 3:利用总RNA合成的cDNA,扩增214 bp的β-actin基因片段。M:分子量标准。
RT-PCR中高效的热启动。
利用cDNA扩增1.1 kb的人白介素1受体 (II型) 片段。使用Supplier L的TaqDNA聚合酶和缓冲液(No hot start);使用Supplier L的抗体介导的热启动酶和缓冲液(Antibody-mediated);使用QIAGEN的HotStarTaq DNA Polymerase和PCR Buffer (HotStarTaq)制备扩增反应,重复三次。M:分子量标准。
高度灵敏的单细胞PCR。
利用流式细胞术分离单细胞,并直接分选至单个PCR管内,扩增500 bp的鼠p53基因片段。使用QIAGEN的HotStarTaq DNA Polymerase和PCR Buffer(HotStarTaq)、Supplier AII的热启动酶和缓冲液(Hot-start enzyme)或Supplier L的抗体介导的热启动酶和缓冲液(Antibody-mediated)制备并行反应。M:分子量标准。
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