KOD-201KOD -Plus-系列酶高保真性聚合酶 (TOYOBO)KOD-201

2024-07-30

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KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201

特征1. 优良的保真性

KOD -Plus-系列的酶具有强力3'→5'核酸外切酶活性(Proof-reading活性),相比KOD DNA polymerase,保真性更高,约为Taq DNA polymerase的80倍。zui适用于克隆。

特征2. 通过热启动提高了PCR反应效率通过将2种抗KOD单克隆抗体预混在酶中,抑制了PCR反应前常温状态下的多聚酶活性和3'→5'核酸外切酶活性(该活性是产生非特异性反应的主要原因)。抗体在PCR的zui初变性步骤即发生失活,对扩增反应没有任何影响。特征3. 延伸性?扩增效率的提高对反应Buffer的组成进行了*化的重组,使之较以往的KOD DNA polymerase延伸性?扩增效率均有很大的提高。特征4. 超群的耐热性因其耐热性比Taq DNA Polymerase更为优良,故可以将热变性步骤的温度设定值提高,对GC-rich等容易形成高级结构的目的片段尤其适用。特征5. 高PCR成功率【KOD -Plus- Ver.2】对难扩增的目的片段、长目的片段的PCR成功率比KOD -plus-更高。另外,也降低了带入的逆转录反应液对PCR反应的抑制。

<几点建议>●PCR产物的克隆由于本酶的PCR产物已被平滑化,可用平滑末端克隆法进行克隆。此时,如已对载体进行了脱磷酸化处理,就需要对PCR产物进行磷酸化,或使用带5'磷酸基的引物。 另外,由于本酶的PCR产物已被平滑化,不能直接进行TA克隆。可使用按以下方法开发的TA克隆试剂盒「TArget Clone -Plus-」。

●PCR条件的设定酶的标准使用量为50μl反应体系1U。延伸反应在68℃条件下进行,按1kb目的片段1min.的标准。出现拖尾条带时,可降低MgSO4浓度,无法确认到扩增时,可提高MgSO4浓度。●GC-rich模板的情况在反应液中添加终浓度为2?5%的DMSO可得到改善。●以RT反应液为模板的情况过量带入RT反应液有可能会对PCR反应产生抑制作用。建议带入到PCR的RT反应液在PCR反应液的1/25以下(在1/50以下)。这样就无需考虑RT反应液中Mg2+、dNTPs的影响,只要按照基本反应条件添加本酶中添付的dNTPs和MgSO4即可。

品名

包装

保存温度

Code No.

价格

KOD -Plus-

200U×1

-20℃

KOD-201

RMB 800

(200U×1)×5

-20℃

KOD-201B

RMB 3700

KOD -Plus- Ver.2

200U×1

-20℃

KOD-211

RMB 1000

(200U×1)×5

-20℃

KOD-211B

RMB 4600

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定点突变导入试剂盒KOD -Plus- MutagenesisKit

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1ml

-20℃

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RMB50

KOD -Plus- Ver.2用Buffer

1ml

-20℃

KOD-3B

RMB50

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