K456001 亚克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒,含 One Shot™ TOP10 Electrocomp™ 大肠杆菌,亚克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒,含 One Shot™ TOP10 Electrocomp™

2024-10-23

亚克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒,含 One Shot™ TOP10 Electrocomp™ 大肠杆菌

货号:K456001,K456040

规格:25 reactions,50 reactions

价格:8132,14888

产品类型:分子克隆

品牌:Thermo Fisher

亚克隆用 TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒可提供高效、5 分钟的一步克隆策略(“TOPO™ 克隆”),用于将Taq聚合酶–扩增 PCR 产物直接插入一个质粒载体上以进行亚克隆。每个试剂盒使用含便利限制性位点的 pCR™ 2.1-TOPO™ TA 载体进行亚克隆。根据您的需要和预算,您可选择含多种感受态细胞或不含感受态细胞的克隆试剂盒。用于亚克隆的 TOPO™ TA 克隆™试剂盒的特点:•快速且简便—从 PCR 至克隆仅需 3 步,手动操作时间短至 5 分钟•高效—可获得高达 95% 含正确插入片段的克隆•久经考验—在过去十余年中性能可靠,引用次数超过 4,000 次•简单—不需要连接酶、PCR 后程序或含有特异性序列的 PCR 引物用于亚克隆的TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒—概述•载体:pCR™ 2.1-TOPO™ TA 载体—含 15 个便利限制性位点(位于您插入片段侧翼)的亚克隆载体,可轻松实现定向亚克隆•克隆方法:TOPO™ TA Cloning™— 含 3′-A 突出端(Taq聚合酶扩增)的 PCR 产物与含 T 突出端的 TOPO™ 载体基于拓扑异构酶 I 进行 5 分钟连接–•感受态细胞:多种选项—从包含一般、高效、噬菌体 T1 抗性或快速生长型感受态细胞的试剂盒中选择或使用您的自有细胞–pCR™ 2.1-TOPO™ TA 载体—简化克隆和亚克隆pCR™ 2.1-TOPO™ TA 载体使用 3'-胸苷 (T) 突出端进行线性化以直接连接Taq聚合酶–扩增 PCR 产物(TA Cloning™),并使用共价结合拓扑异构酶 I 进行“活化”。无需添加连接酶,在 5 分钟内即可完成克隆。位于 PCR 产物插入位点侧翼的 EcoRI 位点,可实现插入片段的简便切除或使用任何位于 PCR 插入片段侧翼的 15 个便利限制性位点的任意组合,可轻松实现定向亚克隆。pCR™ 2.1-TOPO™ TA 克隆选择和操作pCR™ 2.1-TOPO™ TA 载体包含氨苄青霉素和卡那霉素抗性标记物以及用于蓝/白斑筛选的LacZα 基因。简化的基于 TOPO™ 的克隆使用 TOPO™ 克隆技术,无需使用含有特异性序列的 PCR 引物、PCR 后程序、载体制备或其他耗时长的 DNA 操作步骤。只需将 PCR 反应产物直接添加至提供的拓扑异构酶带电载体中,孵育 5 分钟,并使用大肠杆菌感受态细胞进行转化。高效克隆携带所需插入片段的克隆高达 95%,您可以筛选更少的克隆体,从而节省时间和成本。该试剂盒中使用的 pCR™ 2.1-TOPO™ TA 载体含有 3'-T 突出端,用于高效连接含 3'-A 突出端的Taq聚合酶–扩增 PCR 产物。克隆标准在克隆方面,TOPO™ 克隆技术已作为一种可靠技术供成千上万的科学家使用达十余年。快速、简单易用且高效的 TOPO ™克隆已在多种应用中应用于多种不同载体。用于亚克隆的TOPO™ TA 克隆™试剂盒—试剂盒选项根据您的需求,测序用 TOPO™ TA 克隆™试剂盒可与提供不同优势的多种感受态细胞一起购买:• 一般克隆:TOP10 细胞(货号K4500-01、K4500-40)•高效克隆:TOP10 Electrocomp™ 细胞(货号号 K4560-01、K4560-40)• 一般克隆,噬菌体 T1 抗性:DH5α-T1R 细胞(货号 K4520-01、K4520-40)• 快速生长:Mach1™ -T1R 化学感受态大肠杆菌(货号 K4510-20)• 自行提供:灵活性高且可节省成本(货号 450641)我们还提供2个版本的试剂盒,包括 PureLink™ 快速质粒小提试剂盒(货号 K4500-02 和 K4510-02)用于分离清洁、已完成测序的重组质粒。
组份
盒 1:• 拓扑异构酶 I 活化 pCR™2.1-TOPO™ 载体• PCR 缓冲液•盐溶液• dNTP• 对照模板• M13 正向和反向引物• 对照 PCR 引物• 无菌水在 -5 至 -30°C 下储存。妥善储存时,所有试剂均可稳定储存 6 个月。盒 2:• One Shot™ 化学感受态或 Electrocomp™大肠杆菌• S.O.C. 培养基• 超螺旋 pUC19 对照质粒在 -68 至 -85°C 下储存。
数据
TOPO® TA Cloning® Kits contain the popular pCR™2.1 TOPO® TA vector. TOPO® TA Cloning® Kits with Dual Promoter contains pCR™II TOPO® TA vector that allows subsequent in-vitro transcription following cloning.

技术参数
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