stemcell 05983 成肌细胞 贴壁基质,MyoCult™-SF Attachment Substrate/MyoCult™-SF贴壁基质

2024-10-23

MyoCult™-SF Attachment Substrate/MyoCult™-SF贴壁基质

货号:05983

规格:100 µg

价格:1368

产品类型:肌源性干细胞培养

品牌:STEMCELL Technologies

MyoCult™-SF扩增添加物试剂盒 (人) 包含无血清的添加物和贴壁基质(货号#05983),用于培养原代人骨骼肌祖细胞和人多能干来源的成肌细胞。添加物必须和基础培养基(DMEM with 1000 mg/L D-Glucose [货号 #36253]; 分开订购)一起使用,制备完全的 MyoCult™-SF扩增培养基。该培养基已经经过优化用于人骨骼肌祖细胞在体外的分化和维持培养。对于原代成肌细胞,培养皿必须用MyoCult™-SF 贴壁基质包被。对于hPSC来源的成肌细胞,培养皿必须用Corning Matrige包被。 在MyoCult™-SF扩增培养基培养中培养的成肌细胞可以用MyoCult™-SF分化试剂盒(人;货号#05965)分化为多核肌管。

优点:

- 支持无血清条件下人骨骼肌祖细胞的衍生和长期扩增;

- 培养扩增的骨骼肌祖细胞保持分化潜能;

- 严格的原材料筛选和质量控制,尽量减少批次间差异;

- 培养扩增的肌原祖细胞与分化试剂盒兼容。

数据:

图1.人肌源性祖细胞的衍生、扩增和分化工作流程人骨骼肌组织解离成单细胞悬液并接种在 MyoCult™-SF扩增培养基中。 然后利用流式或者EasySep™ 人CD56正选试剂盒(货号 #17855)富集成肌细胞。纯化后的成肌细胞进一步扩增或者分化为肌管用于下游研究。用 MyoCult™-SF扩增试剂盒 (货号 #05980) 获得成肌细胞并进行扩增,使用MyoCult™分化试剂盒进行分化 (货号 #05965)。

图2.人骨骼肌组织在肌MyoCult™-SF扩增培养基中衍生的PAX7肌源性祖细胞人骨骼肌组织在肌MyoCult™-SF扩增培养基或者无血清培养基中衍生肌源性祖细胞 (A) 培养6天后,成肌细胞被固定染色,使用 PAX7 (绿色), 胸腺嘧啶类似物 (EdU,红色) 和细胞核 (DAPI,蓝色)。 确定表达(B) PAX7或(C) PAX7 和 EdU的细胞总量 (n = 4)。 数据经多伦多大学生物化学系penny m.gilbert博士实验室的许可生成和使用。

图3.使用myocult™-SF扩增试剂盒时观察到成肌细胞的长期扩增成肌细胞在MyoCult™-SF扩增试剂盒或者无血清培养基中培养。 (A)在MyoCult™-SF扩增培养基中培养的成肌细胞比在含血清培养基中培养的细胞(n=3)具有更高的扩增速率。 (B)相比无血清培养基,在MyoCult™-SF扩增培养基中扩增的成肌细胞在9代以后产生大量的CD56+细胞。 数据经多伦多大学生物化学系penny m.gilbert博士实验室许可形成并使用。

图4.培养MyoCult™-SF扩增培养基中培养的成肌细胞保持分化和移植入小鼠的潜能

在MyoCult™-SF扩增培养基中培养的成肌细胞,在第5代时使用MyoCult™分化试剂盒(货号#05965)分化为肌管细胞。(A) 成肌细胞分化的肌管用 myosin heavy chain (MyHC;红色) 和细胞核 (DAPI; 蓝色)染色. (B) 融合指数显示约60%是总细胞核和MyHc共表达的肌管细胞。 每个供体用一个黄色的正方形表示。 5个独立捐助者的数据。

图5.myocult™-SF扩增培养基支持iPSC源性肌源性祖细胞的扩增(A)iPSC衍生的肌源性祖细胞在MyoCult™扩增试剂盒中可长期扩增。 利用操作流程A(Chal等人,来自Nature流程,2016)和流程B(Xi 等人,Cell Rep (2017))产生iPSC衍生的肌源性祖细胞。 (B)培养的iPSC衍生肌源性祖细胞表达MyHc(红色)和MyoD(绿色)。

组成成分:

▪MyoCult™-SF扩增10X添加物 (人), 2 x 10 mL▪MyoCult™-SF 贴壁基质, 100 µg

相关产品:

▪MyoCult Differentiation Kit (Human)/成肌细胞分化培养基(人)(货号#05965)

技术参数
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