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HisPur™ Ni-NTA Superflow Agarose,HisPur™ Ni-NTA Superflow Agarose/HisPur Ni-NTA琼脂糖

2024-10-23

HisPur™ Ni-NTA Superflow Agarose/HisPur Ni-NTA琼脂糖

货号：25214,25215,25216,25217

规格：10 mL,50 mL,250 mL,1 L

价格：1789,7374,31311,94677

产品类型：蛋白提取/纯化

品牌：Thermo Fisher

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种由次氮基三乙酸 (NTA) 修饰的 Superflow 6 支持相，带有二价镍电荷 (Ni+2)，可专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行 FPLC 纯化。HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖的特点：•高容量— 在 300 cm/小时线性流速下，每 mL 树脂可结合超过 20 mg His 标签 GFP•高纯度— 用于对裂解物进行纯化时，洗脱组分的纯度可达 80% 以上•通用— 可用于在天然或变性条件下纯化蛋白•稳健— 高度交联的微珠，可耐受高达 1200 cm/小时的线性流速•兼容— 可在各种化学物质和 pH 值环境中保持活性•高性价比— 价格极具竞争力的树脂，经多次清洗和重复利用后仍保持稳定HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种高度交联的耐用树脂，在中等规模或大规模 FPLC 纯化作业所用流速下不会发生压缩。此树脂在各种化学剂和 pH 值环境下均保持稳定，适用于常见的原位清洁流程。与固定化金属亲和色谱 (IMAC) 所使用的钴及其他配体相比，镍对 His 标签蛋白具有更高的纯化能力。HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖在一系列的流速下都表现出较高的动态结合容量，因此是大型纯化作业的极佳之选。应用：•对多聚组氨酸标签蛋白进行中等规模至大规模 FPLC 纯化亲和色谱是一种常用的快速简便的重组蛋白纯化方法。在这类纯化方法中，有一种是将多聚组氨酸标签结合到二价金属阳离子上，此金属阳离子则是由固定在磁珠支持相上的螯合剂进行协调。当对 His 标签蛋白进行固定化金属亲和色谱 (IMAC) 纯化时，微珠、螯合剂以及固定金属的类型将会影响这些纯化操作的纯度、得率以及流速性能。HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种由次氮基三乙酸 (NTA) 修饰的 Superflow 6 支持物，带有二价镍电荷 (Ni+2)，专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行 FPLC 纯化。若要验证树脂的性能，请在 100 L 反应体系内过度表达 6xHis-GFP，然后分段收集细胞团块。使用 2 L 补充 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂（产品编号：78439）的裂解缓冲液对一部分生物体团块 (240 g) 进行裂解。净化裂解产物，然后将其分为两份。然后，在两个等效的 200 mL 微珠填充柱中，分别使用 HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖以及一种主要竞争者树脂对靶蛋白进行纯化。两种树脂的总得率、回收率以及纯度 (>80%) 均非常接近，在不到 3 个小时的时间内纯化了 4 克以上的靶蛋白。

数据：

Properties of Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Superflow Agarose

High-yield, high-purity, medium-scale purification of 6xHisTagged proteinMore than 4 grams of over-expressed 6xHis-GFP were purified in 3 hours using 200mL columns containing HisPur Ni-NTA Superflow Agarose or Qiagen™ Ni-NTA Superflow. One liter of lysate was loaded at a flow rate of 20mL/min, then washed until baseline with wash buffer containing 30mM imidazole. Bound protein was eluted with buffer containing 300mM imidazole. Fractions containing purified 6xHis-GFP were pooled and quantitated using Pierce 660nm Protein Assay (Part No. 22662). Load, flow-through, wash, and eluate fractions were separated by SDS-PAGE, stained with Imperial Protein Stain (Part No. 24615) and evaluated using myImageAnalysis Software (Part No. 62237) to determine purity.

技术参数

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