伯乐印迹膜上总蛋白检测 | Bio-Rad Laboratories

检测 Western 印迹膜上的所有蛋白，提供电泳图谱的可见图像，可帮助鉴定复杂蛋白混合物内的特异抗原。

描述

检测 Western 印迹膜上的所有蛋白，提供电泳图谱的可见图像，可帮助鉴定复杂蛋白混合物内的特异抗原。 Western 杂交染料的敏感度与凝胶染料相当。

Bio-Rad 提供了四种适用于总蛋白质检测的染色剂选项：

SYPRO Ruby 蛋白印迹染色剂 — 提供在 PVDF 或硝酸纤维素膜上高度灵敏的蛋白质检测。 使用染色剂可以使样品蛋白质和分子量标准品直接显示在印迹上，因而不必对重复的凝胶染色或猜测蛋白质转移效率。 染色后，可通过比色或化学发光免疫染色法检测到目标蛋白质，或通过微层序或质谱对目标蛋白质进行分析，而不会受到染色的干扰。

Biotin-Blot 总蛋白染色剂 — 经过优化，可对与硝化纤维素膜或 Zeta-Probe 尼龙膜结合的总蛋白进行毫微克水平的检测。 可方便地将使用 Biotin-Blot 方法分析其总蛋白质的膜与已使用抗体或其他配体进行标记的重复膜进行比较。 抗原蛋白质和免疫复合物可轻松关联起来，因为直接对比重复膜可消除评估已收缩和变形的凝胶时产生的问题。 这种检测方法基于抗生物素对生物素的亲和性以及产生的稳定抗生物素-生物素复合物。

考马斯亮蓝 R–250 染料 — 阴离子染料，用于对凝胶及 PVDF 和尼龙膜进行染色。 它是一种快速且便宜的染料，可检测毫微克水平的蛋白质。 由于这种染料可以干扰抗体结合位点，因此不推荐使用后续蛋白免疫检测。

胶体金总蛋白染色剂 — 经过优化的稳定金溶液，可快速、灵敏地鉴定与硝酸纤维素膜结合的蛋白质（Rohringer 和 Holden，1985）。 蛋白质条带使用胶体金溶液将培养膜染成深红色。 染色的膜可产生蛋白谱的永久记录，以便与免疫染色结果进行精确比较。 提供了胶体金总蛋白染色剂可随时使用。

参考

Rohringer R and Holden DW (1985). Western 杂交： 使用胶体金检测蛋白质，以及使用与生物素共轭的探针和酶探针检测糖蛋白和凝集素。 Anal Biochem 144，118–127。