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通用植物总RNA提取试剂
本试剂用于从各种植物中提取纯化高品质总 RNA,也适用于真菌菌丝 RNA 的提取。可使多聚糖等各种污染物通过洗涤被有效去除,提取的 RNA 可用于 Northern Blot、Dot Blot 、RT-PCR 和体外翻译等实验。
操作步骤
1.取 1ml Buffer RL,转入 1.5ml 离心管(自备)中,65℃水浴,备用。
2.取植物新鲜组织 50-100 mg,加入液氮迅速研磨成粉末,将粉末转入上述装有裂解液的离心管中,立即涡旋剧烈震荡混匀,65℃孵育 10 分钟以使核蛋白体*全分解。
3.室温条件下 13,000×g 离心 5 分钟。取上清转入一个新的 2ml Rnase-free 离心管(自备)中,加入等体积的水饱和酚:氯仿:异戊醇(25:24:1),涡旋混匀, 室温放置2 分钟,13,000×g 离心 3 分钟。
4.上清转入一个新的 2ml Rnase-free 离心管(自备)中,加入等体积异丙醇,颠倒混匀,室温放置 5 分钟。室温条件下 13,000×g 离心 5 分钟,弃上清,此时在管侧和管底形成胶状沉淀。
5.加入 1ml 75%乙醇,剧烈涡旋,室温条件下 12,000×g 离心 5 分钟。弃上清尽量除尽乙醇,室温晾干沉淀(大约 5 分钟左右)。
6. 重复步骤 5。
7. 加 40ul Rnase-free Water 溶解沉淀,样品保存于-70℃以备长期使用。
适用范围:
植物总 RNA 提取
保存条件:室温
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途
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