血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒-试剂盒

2024-07-24

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血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒

微量法 100管/96样

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

高密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,运载周围组织中的胆固醇,再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出,是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白,是冠心病的保护因子,俗称“血管清道夫",对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。

测定原理

用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸,从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2;再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品

离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加5mL试剂四充分溶解。

试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。

标准品:液体1mL×1支,4℃保存。

样品处理

取血后3小时内分离血清,将血清样品与试剂一按照1:1的比例充分混匀,25℃静置15min,2000g离心15min,上清置于冰上待测。

测定操作表

空白管

标准管

测定管

蒸馏水(μL)

4

标准品(μL)

4

样本(μL)

4

试剂二(μL)

150

150

150

试剂三(μL)

50

50

50

混匀,37℃静置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管调零,测定500nm处吸光值A。分别记为A标准管和A测定管

计算公式

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

HDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管

=5×A测定管÷A标准管

C标准管:5mmol/L

b.用96孔板测定的计算公式如下

HDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管

=5×A测定管÷A标准管

C标准管:5mmol/L

注意事项

  1. 样本切勿反复冻融,最好在取血后12小时内完成测定。

  2. 配置好的试剂三4℃保存可半个月。

  3. 线性范围为0.15mmol/L-3.8mmol/L。

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