土壤无机磷(SPHOS)含量测试盒-试剂盒

2024-07-24

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土壤无机磷(SPHOS)含量测试盒

微量法 100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

磷是植物必需大量元素。植物主要通过根系从土壤中获取磷元素。土壤磷包括有机磷和无机磷。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷,才能进一步被植物吸收利用。

测定原理:

从土壤中提取无机磷,在酸性环境中,通过钼蓝法定磷,即可计算出无机磷含量。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、可调式水浴锅,分析天平、可调式移液器、蒸馏水和100目筛子。

试剂组成和配制:

提取液:液体×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前配制,加入8mL蒸馏水,充分溶解后加入4mL试剂二,混匀。

标准品:液体×1支,20μmol/L无机磷标准液,4℃保存。

土壤无机磷提取:

取10mL离心管,加入精确称取的100目筛子过筛的风干土样约0.01g,加入1mL提取液,震荡混匀,然后置于40℃水浴浸提1h,8000g,25℃,离心10min,取上清液,待测。

测定步骤:

1. 分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。

2. 打开水浴锅,调节温度到40℃。

3.空白管:取EP管,依次加入100μL蒸馏水,100μL试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A空白管。

4.标准管:取EP管,依次加入10μL标准液,90μL蒸馏水,100μL试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A标准管。

5.测定管:取EP管,依次加入10μL上清液,90μL蒸馏水,100μL试剂三,混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,记为A测定管。

需在40min内完成比色。

注意:空白管和标准管只需测定一次。

土壤无机磷含量计算公式:

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

S-PHOS(μmol /g 干重)=[C标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)]×V总÷W

=0.02×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)÷W

C标准液:20 μmol/L;V总:总上清液体积,1 mL=0.001 L;W:土壤样品质量,g。

b.使用96孔板测定的计算公式如下

S-PHOS(μmol /g干重)=[C标准液×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)]×V总÷W

=0.02×(A测定-A空白)÷(A标准-A空白)÷W

C标准液:20 μmol/L;V总:总上清液体积,1 mL=0.001 L;W:土壤样品质量,g。

注意事项:

试剂三需临用前配制,限当天使用。试剂三配制过程中,可能会产生黑色固体,其不影响结果,注意吸取时不要将黑色固体吸入。

40min内完成比色。

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土壤无机磷(SPHOS)含量测试盒

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