MB120-sydlabs:核糖核酸酶 A 溶液-酶类

2024-07-24

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sydlabs:核糖核酸酶 A 溶液

核糖核酸酶 A (RNase A) 的用途是什么?除了 RNA 序列分析和 RNase 保护测定之外,RNase A 还常用于质粒和基因组 DNA 纯化以及蛋白质提取过程。

胰腺核糖核酸酶是一种分泌酶,属于胰腺核糖核酸酶家族。 RNase A 是一种核酸内切酶,可裂解嘧啶碱基 3' 侧的内部磷酸二酯 RNA 键。 RNase A 更喜欢以聚 (C) 作为底物并水解 2',3'-环状核苷酸。 RNase A 作用于单链和双链 RNA。

MB120:RNase A 溶液

重组核糖核酸酶 A (RNase A) 是由酵母细胞产生的,带有编码基因工程牛胰腺核糖核酸酶的克隆基因。CAS 号:9001-99-4。欧共体:3.1.27.5。分子量:13.7 kDa。等电点:9.6。pH范围:6-10;在pH 7.6-8.0范围内具有高活性。单位定义:当酵母 RNA 在 37°C、pH 5.0 下水解时,1 个单位的 RNase A 酶会导致 260 nm 处的吸光度增加 1.0 个单位。五十个单位大约相当于 1 个库尼茨单位。比活性:≥ 40 Kunitz 单位/毫克蛋白质。温度曲线:建议温度范围15-70°C; 60°C 时具有最大活性。消光系数:E1%=7.1; 280纳米。纯度:>95%(通过还原 SDS-PAGE)。每批 RNase A(溶液和粉末)均经过测试,以确保不含蛋白酶、核酸内切酶、核酸外切酶、DNase 和 DNA。使用前无需加热。在 40 µg 蛋白酶 K 与 1 ug λ DNA 在 37°C 下孵育 6 小时的质量控制程序中未检测到 DNase。该制剂被认为不含 DNase。剂型:溶液。溶液制备:要制备 10 mg/mL RNase A 库存溶液,请将 10 mg RNase A 溶解在 1 mL 缓冲液中:10 mM Tris-HCl、15 mM NaCl,pH 7.5。根据应用,推荐的 RNase A 浓度为 1 至 100 µg/mL。要从质粒制备物中去除 RNA,请使用 10 μg/ml 工作溶液并在室温下孵育样品 1 小时。为了制备双链 cDNA 的“平端",请使用 100 ng/ml 工作溶液。活化剂:钾盐和钠盐。该酶在多种反应条件下都具有活性。在低盐浓度(0 至 100 mM NaCl)下,RNase A 切割单链和双链 RNA 以及 RNA-DNA 杂交体中的 RNA 链。然而,当 NaCl 浓度为 0.3 M 或更高时,RNase A 会特异性切割单链 RNA。抑制剂:通过 His 12 和 His 119 的烷基化。RNase A 对玻璃表面具有高亲和力。在中性 pH 值和高浓度 (>10 mg/ml) 下,酶会沉淀。该酶受到焦碳酸二乙酯 (DEPC)、胍盐 (4 M GuSCN)、β-巯基乙醇、重金属和 RNase 抑制剂(如 RIBOPROTECT (RT33))的抑制。为了从样品中去除酶,请使用旋转柱或多次苯酚/氯仿萃取进行分离。

运输:重组 RNase A 溶液用冰袋运输。收到后,立即将其存放在下面建议的温度下。稳定性和储存:使用手动除霜冰箱并避免重复冻融循环。如果储存在 -20 至 -70°C 下,自收到之日起 24 个月。如果储存在 2–8°C,则自收到之日起 12 个月。如果储存在 -20 至 -70°C 下,重构后可保存 12 个月。

sydlabs:核糖核酸酶 A 溶液

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