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sydlabs：核糖核酸酶 A 溶液

核糖核酸酶 A (RNase A) 的用途是什么？除了 RNA 序列分析和 RNase 保护测定之外，RNase A 还常用于质粒和基因组 DNA 纯化以及蛋白质提取过程。

胰腺核糖核酸酶是一种分泌酶，属于胰腺核糖核酸酶家族。 RNase A 是一种核酸内切酶，可裂解嘧啶碱基 3' 侧的内部磷酸二酯 RNA 键。 RNase A 更喜欢以聚 (C) 作为底物并水解 2',3'-环状核苷酸。 RNase A 作用于单链和双链 RNA。

重组核糖核酸酶 A (RNase A) 是由酵母细胞产生的，带有编码基因工程牛胰腺核糖核酸酶的克隆基因。CAS 号：9001-99-4。欧共体：3.1.27.5。分子量：13.7 kDa。等电点：9.6。pH范围：6-10；在pH 7.6-8.0范围内具有高活性。单位定义：当酵母 RNA 在 37°C、pH 5.0 下水解时，1 个单位的 RNase A 酶会导致 260 nm 处的吸光度增加 1.0 个单位。五十个单位大约相当于 1 个库尼茨单位。比活性：≥ 40 Kunitz 单位/毫克蛋白质。温度曲线：建议温度范围15-70°C； 60°C 时具有最大活性。消光系数：E^1%=7.1； 280纳米。纯度：>95%（通过还原 SDS-PAGE）。每批 RNase A（溶液和粉末）均经过测试，以确保不含蛋白酶、核酸内切酶、核酸外切酶、DNase 和 DNA。使用前无需加热。在 40 µg 蛋白酶 K 与 1 ug λ DNA 在 37°C 下孵育 6 小时的质量控制程序中未检测到 DNase。该制剂被认为不含 DNase。剂型：溶液。溶液制备：要制备 10 mg/mL RNase A 库存溶液，请将 10 mg RNase A 溶解在 1 mL 缓冲液中：10 mM Tris-HCl、15 mM NaCl，pH 7.5。根据应用，推荐的 RNase A 浓度为 1 至 100 µg/mL。要从质粒制备物中去除 RNA，请使用 10 μg/ml 工作溶液并在室温下孵育样品 1 小时。为了制备双链 cDNA 的“平端"，请使用 100 ng/ml 工作溶液。活化剂：钾盐和钠盐。该酶在多种反应条件下都具有活性。在低盐浓度（0 至 100 mM NaCl）下，RNase A 切割单链和双链 RNA 以及 RNA-DNA 杂交体中的 RNA 链。然而，当 NaCl 浓度为 0.3 M 或更高时，RNase A 会特异性切割单链 RNA。抑制剂：通过 His 12 和 His 119 的烷基化。RNase A 对玻璃表面具有高亲和力。在中性 pH 值和高浓度 (>10 mg/ml) 下，酶会沉淀。该酶受到焦碳酸二乙酯 (DEPC)、胍盐 (4 M GuSCN)、β-巯基乙醇、重金属和 RNase 抑制剂（如 RIBOPROTECT (RT33)）的抑制。为了从样品中去除酶，请使用旋转柱或多次苯酚/氯仿萃取进行分离。

运输：重组 RNase A 溶液用冰袋运输。收到后，立即将其存放在下面建议的温度下。稳定性和储存：使用手动除霜冰箱并避免重复冻融循环。如果储存在 -20 至 -70°C 下，自收到之日起 24 个月。如果储存在 2–8°C，则自收到之日起 12 个月。如果储存在 -20 至 -70°C 下，重构后可保存 12 个月。

sydlabs：核糖核酸酶 A 溶液