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jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

jembio产品供应

KlenTaq1是一种热稳定性 DNA 聚合酶，由编码栖热菌 DNA 聚合酶的基因的 5' 缺失表达，从而具有高度活性且热稳定性更高的 DNA 聚合酶活性。在反应缓冲液 PC2 中重复暴露于 980°C 似乎不会降低酶活性。即使暴露于 990°C 后仍保留显着的活性。全长酶不能耐受这些处理。 KlenTaq1 ™ 酶缺少野生型全长 Taq DNA 聚合酶的 N 末端部分。该蛋白的这一部分与大肠杆菌 DNA 聚合酶 1 的 5' 核酸外切酶区域同源。 因此， KlenTaq1 ™ 与 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。 对于不含甘油的KlenTaq1 （目录号 1001 NGKT）：将酶和缓冲液储存在 4°C 下。储存缓冲液为 50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。 对于50% 甘油中的KlenTaq1 （目录号 1001）：将酶储存在 -200°C 下，将缓冲液储存在 40°C 下。储存缓冲液中的甘油可防止在 -20°C 下冻结，但 Thesit 在此温度下会导致一些稠化。可以选择，但建议在分配前在冰上加热至 0°C。对于长期储存，可以使用 -70°C 或 -80°C，但我们建议酶不要冷冻多次。重新冷冻和解冻会导致酶活性降低。储存缓冲液为 50% 甘油（v/v；63% w/v）、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。 浓度：5 KlenTaq1™单位（72°C 下 30 分钟内掺入 60 nmole）。以活化的鲑鱼精子DNA为模板； PC2（见下文）是缓冲区。请注意，这些单位比标准单位大 6 倍。以标准单位（10 nmole/30 分钟）计算，此处的酶浓度约为 30 单位/ml。 尽管该酶在多种条件下都能良好发挥作用，但推荐的反应缓冲液 PC2 为：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸铵、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（随订单提供） 。请注意，与其他热稳定性 DNA 聚合酶缓冲液相比，不含 KC1 和明胶。 dNTP 浓度可以从每个 50 µM 到每个 1.2 mM 不等，但通常使用 200 µM。如果 DNA 掺入超过 500 bp，您将需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。 KlenTaq1™ 的运输浓度为 25-30 u/μl，因此如果使用与全长 Taq DNA 聚合酶相同的数量（罗氏推荐），它可以轻松掺入 2000 bp。

jembio专注于DNA修饰酶，特别是TAQ DNA聚合酶。KlenTaq1和KlenTaq-S是我们的主要销售产品。

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