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StainODye Nitrocellulose Membrane Protein Stain，产品型号：FGI-1933。

StainODye Nitrocellulose Membrane Protein Stain，

概述

提供为：含 0.05% 防腐剂的磷酸盐缓冲盐水中的 2 mg/ml 蛋白 A 纯化兔 IgG。

是高度纯化的人 PARP1 蛋白，在杆状病毒表达系统中表达。PARP1 具有很高的比活性，大约。20000 U/mg（1U=10 fmol ADP-核糖在 30 分钟@RT 内并入固定化组蛋白）。它在特殊条件下从其天然状态冻干，用水重构后，它保留了其天然聚 ADP-核糖基化酶活性。SDS-PAGE 的纯度 > 95%。每个小瓶包含 50 µg PARP1（约 1000 单位）。

●用于高通量酶活性/抑制测定

●目标蛋白的聚-ADP-核糖基化

●Western Blot，100 ng/lane，使用 HRP/TMB 比色法

●ELISA，2 ng/孔

●SDS-PAGE, 1 µg/泳道

●作为其他检测的标准

供应形式：冻干固体，50µg/管

优点

• 快速确定蛋白质在纯硝酸纤维素/支持的硝酸纤维素和带电膜上的转移效率

• 避免因转印不均匀、不转印和气泡而重新做western blots

• 染色膜可以拍照，用于西方印迹协议中的质量控制步骤。

• 与硝酸纤维素膜和 PVDF 膜兼容

• 防腐剂允许在室温下保质期为 1年

协议

1.将 10 x 12 cm 膜的大约 10-15 mL 染料倒入干净的玻璃容器中。

1. 2.通过在摇摆平台上缓慢摇动 1-2 分钟来孵育膜。

2. 3.去除并丢弃多余的染料，用蒸馏水或 PBS 清洗膜，直到背景清晰。

1. 可能需要多次洗涤以获得最佳信噪比。

3. 4.膜可以立即拍照，干燥的膜可以用水润湿来拍照。

4. 5.长期存放时条带可能会轻微褪色。立即记录颜色强度可获得最佳效果

StainODyeTM是一种可逆且灵敏的工具，用于检测蛋白质在硝酸纤维素膜上的转移效率。凭借快速的响应时间、每条带 25-50 ng 的检测下限和快速简便的方案，StainODyeTM是传统丽春红 S 染色的更好替代品。与结合蛋白质的其他染色剂如Amidoblack/Coomassie不同，StainODyeTM对蛋白质具有高亲和力，但在 PBS 或封闭溶液中会被洗掉。 此外，StainODyeTM以高亲和力标记糖基化蛋白总蛋白质的结果可视化。

定量 Western 印迹应用需要将蛋白质均匀转移到膜上，以便对结果进行比较分析。有一些准确的方法可以在电泳前将固定数量的蛋白质加载到凝胶上，但是，很少有方法可以量化蛋白质在硝酸纤维素/带电膜上的转移效率。不均匀转移、非转移和气泡是可能影响定量蛋白质印迹结果的一些问题。StainODyeTM _允许在蛋白质转移到带电膜后立即在硝酸纤维素或其他类型的转移介质上直接观察蛋白质。在StainODyeTM中显影后，蛋白质条带呈红色或粉红色。这些染色的膜可以拍照作为记录。StainODyeTM是可逆的，可以通过用水或 PBS 冲洗印迹来洗掉。或者，它们可以直接孵育在封闭缓冲液 (BlockOBufferTM) 中用于蛋白质印迹。StainODyeTM带有防腐剂，在室温下保质期约为 1 年。

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