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stemcell 05978 RSeT™ Naive,RSeT™ Medium (2-component)/RSeT™培养基 (2-组份)

2024-10-23
RSeT™ Medium (2-component)/RSeT™培养基 (2-组份)

货号：05978

规格：500 mL

价格：5132

产品类型：多能干细胞培养

品牌：STEMCELL Technologies

RSeT无需滋养层培养基是一种成份明确，不含血清的培养基，用于在无滋养层和bFGF的低氧条件下将人的“始发态”（Primed）的多能干细胞(hPSC) 还原为初始态（Naive-like）的hPSCs，并能对其进行维持培养。RSeT是该培养基不含bFGF和TGF-β细胞因子。含有预先筛选优化的组份，以保证批次间的一致性。该培养基与人胚胎干(ES)细胞和人诱导的多能干(iPS)细胞兼容。RSeT培养物带有明显的初始样（naïve-like）特征，比如细胞克隆非常紧密，克隆边缘有光折射呈半球状。表达Naive-like hPSCs相关的重要转录因子，如KLF17, KLF2, KLF4,和TFCP2L1 。ReST培养的Naive多能干当在TeSR1中培养可以返回到primed态，也可以在STEMdiff™内胚层试剂盒(货号#05110)、STEMdiff™ SMADi 神经诱导分化试剂盒 (货号 #08581), and STEMdiff™ 中胚层诱导试剂 (货号 #05220)中进行分化。
优点：
- 单细胞传代，保持正常的细胞核型；- 在没有bFGF 或 TGFβ下保持Naive-样多能性；- 确定培养基含有预先筛选的质量成分，以获得可重复的结果；- 不需要转入外源基因实现primed到Naive的转换。
数据：

图1. 将始发态的hPSCs还原成类原态流程图

将hPSC以聚集体形式接种在mTeSR™1中。第1天，将mTeSR™1替换为RSeT™无滋养层培养基，将培养物转移至低氧条件，并每隔一天更换培养基。在第5或第6天，形成大到足以传代的克隆。在RSeT™无需滋养层细胞培养基的初始培养过程中，早在第一次传代，具有紧致、高穹顶特征的初始样干细胞克隆即会形成。

图2. ES和iPS返回初始态（A）ES细胞（B）iPS细胞系（STiPS-F016）在RSeT无滋养层培养基中分别培养6代和10代后的初始态hPSC典型图片。（C）转换过程中，克隆形态由扁平状态变为典型的Naive阶段的穹顶状态。一旦形成Naive样培养物，典型地>80%的克隆用于穹顶形态。

图3.ES和iPS细胞可以重新返回primed态(A)RSeT™中培养3代的人ES细胞(H1)和(B)在mTeSR™1中培养5天重新返回primed态。

图4.维持在RSet中的hPSC™高表达Naive-PSCs相关的标记在RSet中培养的(A) WLS-1C and (B) STiPS-F019 iPS细胞系高表达Naive-PSCs相关的标记(DNMT3L, KLF17, KLF2, KLF4, NANOG, TBX3, and TCFP2L1)。 用定量PCR(Q PCR)测定表达水平。

图5.在RSet中维持的hPSC在长期传代后显示正常核型分别在RSeT™培养基中培养14和15代的(A)ES细胞(H1)和(B)IPS细胞(WLS-1c)株的代表性核型图
组成成分：
▪RSeT™ 基础培养基，400 mL▪ RSeT™ 5X 添加物，100 mL
相关产品：
▪hPSC培养贴壁基质Vitronectin XF™（货号 #07180）▪hPSC免刮擦传代试剂ReLeSR™（货号 #05872）▪hPSC解离试剂ACCUTASE™（货号 #07920）▪hPSC解离试剂Dispase（1 mg/mL）（货号# 07923）▪RSeT™ Feeder-Free培养基（货号#05975）

▪mTeSR1(货号#85850）

技术参数

产品优点 1.单细胞传代，保持正常的细胞核型； 2.在没有bFGF 或 TGFβ下保持Naive-样多能性； 3.确定培养基含有预先筛选的质量成分，以获得可重复的结果； 4.不需要转入外源基因实现primed到Naive的转换。

产品类型 专业培养基

适用物种 人

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