05590 stemcell Naive,NaïveCult™ Expansion Medium/NaïveCult™ 扩增培养基

2024-10-23

NaïveCult™ Expansion Medium/NaïveCult™ 扩增培养基

货号:05590

规格:1 Kit

价格:5142

产品类型:多能干细胞培养

品牌:STEMCELL Technologies

NaïveCult™诱导培养基成分确定,用于无基因化学诱导人多能干细胞(hPSC)和ES 还原为初始态(Naive-like)。该试剂盒是基于英国剑桥大学剑桥干细胞研究所的许可下开发(2017)。并能对其进行维持培养。RSeT是该培养基不含bFGF和TGF-β细胞因子。含有预先筛选优化的组份,以保证批次间的一致性。该培养基与mTeSR™1 (货号#85850) 或者 TeSR™-E8™ (货号 #05990)培养的人胚胎干(ES)细胞和人诱导的多能干(iPS)细胞兼容。使用NaïveCult™诱导培养基形成的hPSC或ES具有明显的初始样(naïve-like)特征,比如细胞克隆非常紧密,克隆边缘有光折射呈半球状。表达Naive-like hPSCs相关的重要转录因子(Guo et al. 2016; Guo et al. 2017; Takashima et al.).。ReST培养的Naive多能干当在TeSR1中培养可以返回到primed态,也可以在STEMdiff™内胚层试剂盒(货号#05110)、STEMdiff™ SMADi 神经诱导分化试剂盒 (货号#08581), and STEMdiff™ 中胚层诱导试剂 (货号#05220)中进行分化。NaïveCult™ 诱导培养基需要额外添加 histone deacetylase inhibitor (HDACi) (丁酸钠[货号,#72242] 或 丙戊酸[货号 #72292])。
优点:
- 支持Naive态ES和iPS的强烈生长;- 维持hPSC高表达Naive相关基因;- 兼容非转基因诱导、转基因诱导和胚胎来源的NaiveES和IPS细胞;- 成分确定,包含预筛选的组分。
数据:

图1. 将始发态的hPSCs还原成类原态流程图

primed hPSC接种在mTeSR™1或TeSR™-E8™中,基质胶为Corning Matrigel,滋养层细胞为失活的MEF,并添加终浓度为10 uM的 Y-27632,低氧条件下培养24小时。第1天,培养基改为添加组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)的诱导培养基1,细胞培养3天,每天换液。第4天,培养基改为诱导培养基2,细胞培养至第11天,每天换液。在第11天,hPSC单细胞被传代至新鲜的iMEF上,然后每3-4天传代一次,直到第2段在诱导培养基中结束。从第3段开始,hPSC在诱导培养基中培养。背景分化将在第3段和第8段之间减少,此时细胞可以转移到Naivecult™扩增培养基中,以便长期维持和扩增。

图2. ES和iPS返回初始态(A)传7代的ES细胞(B)9代的iPS细胞系(WLS-1C)在NaïveCult™诱导培养基诱导并在NaïveCult™ 扩增培养基中扩增。在转变阶段,克隆形态从扁平形态转变到高度致密、穹顶态。

图3.在NaiveCult诱导培养基中的hPSC™高表达Naive-PSCs相关的标记在NaiveCult诱导培养基中培养的(A) H9 ES cells and (B) WLS-1C iPS细胞系高表达Naive-PSCs相关的标记(DNMT3L, KLF17, KLF2, KLF4, NANOG, TBX3, and TCFP2L1)。

图 4.在NaiveCult™扩增培养基中培养的Naive在返回primed后具有三胚层分化潜能在NaiveCult™扩增培养基中培养的Naive人iPS细胞在mTeSR™1中返回primed后并分化为所有三个体细胞系。(A)人WLS-1C iPS细胞系在 STEMdiff™ 定性内胚层诱导培养基 (货号 #05110) 分化后表达 >90% CXCR4+/SOX17+ 定性内胚层祖细胞的代表流式散点图。(B)人WLS-1C iPS细胞系在 STEMdiff™ 中胚层诱导培养基 (货号#05220) 分化后表达>80% Brachyury+/OCT4-中胚层祖细胞的代表流式散点图。(C)用STEMdiff™Smadi神经诱导培养基(#08581)诱导人WLS-1C细胞分化,染色PAX6(绿色)和SOX1(红色)双阳性的代表性免疫荧光图像。
组成成分:
▪NaïveCult™ 扩增基础培养基, 400 mL▪NaïveCult™ 5X 扩增添加物, 100 mL▪NaïveCult™ 1000X 扩增添加物, 500 µL

相关产品:
▪hPSC培养贴壁基质Vitronectin XF™(货号 #07180)▪hPSC免刮擦传代试剂ReLeSR™(货号 #05872)▪hPSC解离试剂ACCUTASE™(货号 #07920)▪hPSC解离试剂Dispase(1 mg/mL)(货号# 07923)▪RSeT™ Feeder-Free培养基(货号#05975)

▪mTeSR1(货号#85850)

技术参数

产品优点 1.支持Naive态ES和iPS的强烈生长; 2.维持hPSC高表达Naive相关基因; 3.兼容非转基因诱导、转基因诱导和胚胎来源的NaiveES和IPS细胞; 4.成分确定,包含预筛选的组分。

产品应用 扩增; 维持培养; 细胞培养

产品类型 专业培养基

细胞类型 多能干细胞

产品线 NaïveCult

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