SuperSYBR Mixture(With Low ROX)-常用生化试剂

2024-07-24

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SuperSYBR Mixture(With Low ROX)

SuperSYBR Mixture(With Low ROX)是专用于染料法(SYBRGreenⅠ)实时荧光定量 PCR 的预混体系,浓度为 2×,包含 SuperStarTaq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料、Mg2+和 ROX 校正染料,操作简单方便。主要用于基因组 DNA 靶序列和 RNA 反转录后 cDNA 靶序列的检测。本品含有的 SuperStar Taq DNA Polymerase 是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在 95℃下孵育 10 分钟。产品特点本产品中使用了全新高效热启动酶 SuperStar Taq DNA Polymerase与 PCR 缓冲体系,显著提高 PCR 的扩增效率,具有高灵敏度和特异性强的特点。注意事项1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。2. 本产品中含有 SYBR Green I 荧光染料和 ROX 染料,保存本产品或配制 PCR 反应液时应避免强光照射。3. 如需频繁使用,可存放于 2-8℃,尽量避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。使用方法以下举例为常规 PCR 反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

  1. PCR 反应体系(以 50ul 反应体系为例)

2. PCR反应程序建议采用下表显示的两步法 PCR 进行程序设定,本程序是以 ABI7500荧光定量 PCR 仪为例。若因 Tm 值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法 PCR 扩增。

注意:1)退火温度请以 60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。2)本说明是以 ABI 7500 荧光定量 PCR 仪为参照设定,融解曲线分析请以所使用的荧光定量 PCR 仪推荐的程序进行设定。3. 三步法荧光定量PCR(本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例):

注意:1)本产品所采用的热启动酶须在预变性 95℃、10 min 条件下实现酶的活化。2)无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。3)若需提高反应扩增效率,可适当增加延伸时间。4)本说明是以 ABI 7500 荧光定量 PCR 仪为参照设定,融解曲线分析请以所使用的荧光定量 PCR 仪推荐的程序进行设定。

特点:高效 热启动适用范围:荧光定量 PCR保存条件:-20℃避光保存

本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途

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