SuperStar TaqMan Mixture(With ROX)-常用生化试剂

2024-07-24

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SuperStar TaqMan Mixture(With ROX)

专用于探针法(TaqMan, Molecular Beacon 等)实时荧光定量 PCR 的预混体系,浓度为 2×,包含 SuperStar Taq DNA Poly-merase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+和 ROX染料, 操作简单方便。主要用于基因组 DNA 靶序列和 RNA反转录后 cDNA靶序列 检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP 基因型分析等,适用于不同类型 探针法荧光定量。本品含有的SuperStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修 饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激 活须在 95℃下孵育 10 分钟。该 PCR 缓冲体系与热启动酶的组合,显著 提高了 PCR 的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模 板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。所含的 ROX 染料可校正定量 PCR 仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,适用于以 ROX 作为校正染料的所有荧光定量 PCR 仪。

注意事项1. 使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。2. 本产品中含有 ROX 染料,保存本产品或配制 PCR 反应液时应避免强光照射。3. 避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在 2-8℃保存。使用方法以下举例为常规 PCR 反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。1. PCR 反应体系(以 50ul 反应体系为例)

注意:1)通常引物浓度以 0.2uM 可以得到较好结果,可以在 0.1-1.0uM 作为设定范围的参考。2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量 PCR 仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。3)通常 DNA 模板的量以 10-100ng 基因组 DNA 或 1-10ng cDNA 为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。2. PCR反应程序注意!本产品预变性反应必须在 95℃ 10 分钟下完成!两步法 PCR:

注意:1)本产品所采用的热启动酶须在预变性 95℃、10 min 条件下实现酶的活化。2)建议采用两步法 PCR 反应程序,若因使用 Tm 值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法 PCR 扩增,退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。

特点:高效 热启动适用范围:荧光定量 PCR保存条件:-20℃避光保存

本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途

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