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植物基因组DNA快速提取试剂

特*配方的植物 DNA 抽提液（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，只需一步离心即可去除多糖、多酚和蛋白，取上清所得基因组 DNA 用异丙醇沉淀，再通过乙醇漂洗等步骤得到纯净的 DNA。

注意事项（实验前请首先阅读这部分！）1.所有的离心步骤均在室温完成，使用离心力可以达到13,000×g 的高速离心机。2.开始实验前将需要的试剂水浴先预热到65℃备用，Rnase A（10mg/ml）请自备，TE或者无酶水请自备。3.不同来源的植物组织材料中提取的DNA 的量会有差异，一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25ug。4.可以按比例放大提取的体系。

操作步骤* 将 DNA 提取试剂放置在 65℃预热。1.加热 DNA 提取试剂到 65℃。2.取50-100 mg植物新鲜组织或30mg干重组织在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉，或用研磨仪研磨（可以加入预热的 DNA 提取试剂研磨）。3.转移细粉到一个 1.5 ml 离心管中，加入 1ml~1.2ml 预热好的 DNA 提取试剂，再加入 10ul RNase A 剧烈涡旋振荡混匀 1 分钟，65℃水浴 30分钟。4.将离心管转入离心机中 13,000×g 室温离心 3 分钟。下面有两种抽提方法：1）无酚氯仿提取法：a.小心吸取 800ul 上清到一个新的 2ml 离心管，注意不要吸到界面物质，加入 1.2ml 异丙醇混合均匀，13,000×g 离心 2 分钟。b.小心倒掉上清，注意不要倒掉沉淀，加入 1ml 的 70%乙醇震荡漂洗DNA，13,000×g 离心 2 分钟沉淀 DNA，弃上清。c.重复步骤 b。d.用枪尽可能吸取多余的乙醇（注意不要将沉淀的 DNA 吸走），室温晾 2 分钟左右使乙醇挥发，加入 100ul TE 溶解 DNA。可能会有部分沉淀无法溶解，可以离心后取上清。e.DNA 可以存放在 2-8℃,如果要长时间存放，可以放置在-20℃。2）酚氯仿提取法：a.转移第 4 步 800ul 上清到一个新的 2ml 离心管，加入等体积的酚：氯仿：异戊醇=25：24：1 的混合液，涡旋振荡 1min，室温放置 5min。b.13000×g 离心 2 分钟，小心吸取上清到一个 2ml 离心管，注意不要吸到界面物质，与等体积异丙醇混合均匀，13,000×g 离心 2 分钟。c.小心倒掉上清，加入 1ml 的 70%乙醇漂洗 DNA，13,000×g 离心 2分钟。d.重复步骤 c。e.用枪尽可能吸取多余的乙醇，室温2分钟左右使乙醇挥发，加入100ulTE 溶解 DNA。f.DNA 可以存放在 2-8℃,如果要长时间存放，可以放置在-20℃。

保存条件：室温

本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途

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