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快捷型植物基因组 DNA 提取试剂盒
适用范围:植物 DNA 提取试剂盒组分:Buffer FA 80mlBuffer FB 28mlBuffer GE 20mlRnase A(10 mg/ml) 1.2ml
保存条件:Buffer GE 4°CRnase A 4°C其它组分室温保存
本试剂盒采用特*的缓冲液系统,特别适合从植物干粉或者新鲜植物材料中提取 基因组 DNA。无需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可***限度去除杂质蛋白及细胞中 其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制,实验者可根据自己的需求灵活调整。
提取的基因组 DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。 使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、 Southern杂交等实验。
产品特点简单快速:1h 内即可获得超纯的基因组 DNA。广泛:适用于各种植物组织。超纯:获得的 DNA 纯度高,可直接用于 PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
注意事项1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量也下降。2.Buffer FA 可能会发黄,并不影响提取效果。3.若缓冲液 FA 或 FB 有沉淀析出,可在 37℃水浴溶解,摇匀后使用。4.所有离心步骤均为使用台式离心机,室温下离心。操作步骤1.取植物新鲜组织 100 mg 或干重组织 20 mg,加入液氮充分碾磨。加入 400ul Buffer FA 和 6ul 的 Rnase A(10 mg/ml),旋涡振荡 1min,室温放置 10min。注意:由于植物材料多样性非常丰富,所取实验材料的最适量需根据材料的不同,或相同材料的不同组织等进行摸索。。2.加入 130ul Buffer FB,充分混匀,涡旋振荡 1min。3.14,000×g 离心 3min,将上清转移至新的离心管中。4.将上清液再次 14,000×g 离心 5min,将上清转移至新的离心管中。注意:此步骤目的为去除上清液中的沉淀杂质,使提取基因组 DNA 纯度更高。5.向上清液中加入 0.7 倍体积的异丙醇,充分混匀,此时会出现絮状基因组 DNA。(例如 500ul 的上清液加 350ul 异丙醇),13,000×g 离心 2 min,弃上清,保留沉淀。6.加入 600ul 70%乙醇,涡旋振荡 5sec,13,000×g 离心 2 min,弃上清。7.重复步骤 6。8.开盖倒置,室温 5-10 min,晾干残余的乙醇。注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR 等)实验。9.加入适量 Buffer GE,65℃水浴 10-60 min 溶解 DNA,其间颠倒混匀数次助溶。最终得到 DNA 溶液。DNA 浓度及纯度检测得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA 应在 OD260 处有显著吸收峰,OD260 值为 1相当于大约 50ug/ml双链 DNA、40 ug/ml 单链 DNA。OD260/OD280 比值应为 1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用 ddH2O,比值会偏低,因为 pH 值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途
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