植物硝态氮测试盒-试剂盒

2024-07-24

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植物硝态氮测试盒

微量法100T/96S

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

测定原理

在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量。

自备实验用品及仪器

蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制

试剂一:粉剂×2支,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加1.2mL浓硫酸充分溶解。

试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1支,4℃保存。

样本处理

按照质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min,期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min,待冷却后于25℃,12000g离心15min,取上清待测。(深色植物匀浆后加入约3mg试剂三后再提取)

测定操作表

  1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至410nm,蒸馏水调零。

  2. 在EP管中如下表加样

空白管

测定管

样本(μL)

10

蒸馏水(μL)

10

试剂一(μL)

20

20

充分混匀,25℃静置30min

试剂二(μL)

475

475

混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,转移200uL至微量石英比色皿/96孔板中测定410nm处吸光值A,△A=A测定管-A空白管

注意:空白管只需测定一次。

计算公式

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.0156x+0.0073,R2=0.9997

NO3——N含量(mg/kg鲜重)=(△A-0.0073)÷0.0156÷(W÷V样总)

=64.1×(△A-0.0073)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

  1. 用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.0078x+0.0073,R2=0.9997

NO3——N(mg/kg鲜重)=(△A-0.0073)÷0.0078÷(W÷V样总)

=128.2×(△A-0.0073)÷W

V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g

注意事项

  1. 试剂一配制好后尽快使用,4℃可保存一周。

  2. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。

  3. *低检出限为2μg/g。

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