土壤蔗糖酶(SSC)测试盒-试剂盒

2024-07-24

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土壤蔗糖酶(SSC)测试盒

微量法 100管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。

测定原理:

S-SC催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:甲苯1mL×1瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:液体7.5mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入22mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;

试剂四:液体22mL×1瓶,4℃保存。

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.03

0.03

试剂一(μL)

5

5

振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴15min

试剂二(μL)

75

75

试剂三(μL)

220

蒸馏水(μL)

220

充分混匀,放入37℃水浴培养24小时,10000 g,4℃,离心5min,取上清液

上清液(μL)

85

85

试剂四(μL)

215

215

充分混匀,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却,蒸馏水稀释10倍(可以吸取100μL,加入900μL蒸馏水稀释;若吸光度大于4,可以加大稀释倍数),取200uL至微量石英比色皿或96孔板中510nm处读吸光值A。计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。

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