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epochlifescience：CloneRanger 拓扑异构酶试剂盒

CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning Kit专为同等效率地克隆两个平端片段而设计零背景全拓扑异构酶克隆试剂盒利用痘苗病毒拓扑异构酶 I 的 DNA 链转移活性，快速克隆长达 10 kb 的 DNA 片段。痘苗病毒 DNA 拓扑异构酶 I 与含有 5' CCCTT↓ 切割识别基序的质粒载体形成 3'-磷酰基中间体。然后，共价结合的拓扑异构酶 I 将切割的载体 DNA 链转移到带有游离 5'-OH 末端的待克隆 DNA 片段（参见下图）。该转移反应快速且可重复。该试剂盒中包含的克隆载体 pCloneEZ-Omni-Amp/HC 和 pCloneEZ-Omni-Kan/HC 是经过改造的高拷贝数质粒，可耐受轻度毒性基因。可快速克隆剧毒基因。

不包括感受态细胞。

零背景：> 90% 的随机挑选的克隆包含正确的插入片段。

快速：PCR片段与载体混合后立即转化，无需孵育。

CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning 试剂盒流程图：

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