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eBgDy™ Terminator 3.1 循环测序试剂盒

eBgDy™ Terminator v3.1 循环测序试剂盒用于对 DNA 样本进行桑格测序。它旨在提供具有高精度和最小噪音的高质量测序数据。

eBgDy™ Terminator v3.1 循环测序试剂盒可直接替代 Applied Biosystem 的 BigDye™ Terminator v3.1 循环测序试剂盒。当前 BigDye™ v3.1 用户可以无缝切换到 eBgDy™ v3.1，而无需更改当前协议。无需安装新软件或移动转移文件。也不需要新的校准或验证。

该试剂盒包括 eBgDy™ Terminator v3.1 测序混合物，其中包含用不同荧光染料标记的双脱氧核苷酸终止子的专有混合物。该混合物还包括 DNA 聚合酶，它将退火的引物延伸到 DNA 模板上，并掺入荧光标记的双脱氧核苷酸终止子，从而导致链终止和不同长度 DNA 片段的合成。

测序反应通常在热循环仪中进行，它使用一系列温度循环来控制引物的退火和延伸。反应完成后，产物被纯化并加载到毛细管电泳仪器上，例如Applied Biosystems 3730xl DNA分析仪，它按大小分离片段并检测荧光信号。

eBgDy™ Terminator v3.1 循环测序试剂盒具有以下功能：

• 高准确度：该试剂盒提供高质量的测序数据，准确度高，噪音极小，适合广泛的应用，包括从头测序、变异检测和基因分型。

• 应用范围广：该试剂盒可用于多种DNA模板的测序，包括PCR产物、质粒、BAC、fosmid等。

• 易于使用：该试剂盒设计易于使用，具有简单的反应设置和标准化方案。

与 BigDye™ v3.1 相比，eBgDy™ v3.1 还带来了许多优势

• 更快的反应周期：eBgDy™ 需要 3 分钟的延伸时间，而不是 4 分钟，如果需要，可以进一步缩短至 2 分钟。

• 更高的稀释倍数：只需 0.15 µl 的 eBgDy™ 即可在 5 µl 总体积反应中成功使用（图 1）

• 更高的成功率：特别是对于困难的模板（图2）

图 1 上图：使用 0.15 µl BigDye™ v3.1 得到的正常模板的原始测序信号，一式两份。下图：使用 0.15 µl eBgDy™ 得到的相同正常模板的原始测序信号。总反应体积为 5 µl。

图 2 上图：使用 0.15 µl BigDye™ v3.1 得到的富含 GT 模板的原始测序信号，一式两份。下图：使用 0.15 µl eBgDy™ 得到相同 GT 丰富模板的原始测序信号。总反应体积为 5 µl。

图3.使用在 ABI 3730XL DNA 分析仪上运行的 eBgDy™ Terminator v3.1 循环测序试剂盒获得 DNA 测序碱基检出结果。

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